人用轮状病毒疫苗及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107412765A(43)申请公布日2017.12.01(21)申请号201710278659.7(51)Int.Cl.(22)申请日2014.09.23A61K39/385(2006.01)A61K39/116(2006.01)(66)本国优先权数据A61K39/09(2006.01)201410359131.92014.07.25CNA61P31/04(2006.01)(62)分案原申请数据201410487361.32014.09.23(71)申请人武汉博沃生物科技有限公司地址430075湖北省武汉市东湖高新区高新大道858号生物医药产业园中小企业园A9-2栋(72)发明人李东鲍路伟史晋吴克(74)专利代理机构上海精晟知识产权代理有限公司31253代理人熊娴冯子玲权利要求书1页说明书22页附图2页(54)发明名称人用轮状病毒疫苗及其制备方法(57)摘要本发明公开了人用轮状病毒疫苗，其为多价肺炎球菌多糖与两种或两种以上的载体蛋白经连接体而成的缀合疫苗，其中，连接体为磁性纳米微球，载体蛋白之一为轮状病毒蛋白。该人用轮状病毒疫苗的制备方法将多价肺炎球菌多糖与两种或以上的载体蛋白(其一为轮状病毒载体蛋白)分别与磁性纳米微球经偶联而成。本发明提供的人用轮状病毒疫苗制备工艺简单，采用纳米微球为连接物的人用轮状病毒疫苗能够增强小鼠Th1型免疫应答，以及多糖特异性抗体的免疫持效性、特异性和亲和性，此外还可诱导小鼠产生轮状病毒抗体；具备两种疫苗的预防效果；因此具有十分广阔的应用前景。CN107412765ACN107412765A权利要求书1/1页1.人用轮状病毒疫苗，其特征在于：所述人用轮状病毒疫苗为多价肺炎球菌多糖与两种或两种以上的载体蛋白经连接体而成的人用轮状病毒疫苗，其中，连接体为磁性纳米微球，两种或两种以上载体蛋白中的其一为轮状病毒蛋白。2.根据权利要求1所述的人用轮状病毒疫苗，其特征在于：所述磁性纳米微的磁性微粒位于纳米微球的内部为核，高分子材料包裹于磁性微粒的外部。3.根据权利要求2所述的人用轮状病毒疫苗，其特征在于：高分子材料为生物高分子材料，选自壳聚糖、聚乙二醇、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚乳酸-聚乙二醇共聚物(PELA)中的一种或以上的混合物。4.根据权利要求1所述的人用轮状病毒疫苗，其特征在于：多价肺炎球菌多糖与两种载体蛋白的质量比为(0.5～2)：1。5.根据权利要求1所述的人用轮状病毒疫苗，其特征在于：两种或两种以上载体蛋白中的另一载体蛋白选自白喉类毒素，破伤风类毒素，载体蛋白CRM197，嗜血流感杆菌表面蛋白HiD，百日咳Prn表面蛋白，百日咳Fha抗原和/或肺炎球菌表面蛋白A(rPspA)。6.根据权利要求1所述的人用轮状病毒疫苗，其特征在于：轮状病毒蛋白为重组人轮状病毒蛋白。7.根据权利要求1所述的人用轮状病毒疫苗，其特征在于：重组人轮状病毒蛋白为P基因型轮状病毒蛋白的部分氨基酸序列或全序列。8.根据权利要求1所述的人用轮状病毒疫苗，其特征在于：重组人轮状病毒蛋白的病毒株为P基因型轮状病毒毒株P[8]、P[4]、P[6]或P[11]中的一种。9.权利要求1～8任一所述人用轮状病毒疫苗的制备方法，其特征在于：将多价肺炎球菌多糖与两种或以上的载体蛋白分别与纳米微球经偶联而成。10.根据权利要求9所述的人用轮状病毒疫苗的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：a)分别分离提纯多种血清型肺炎球菌荚膜上的荚膜多糖；b)分别制备并分离提纯所选用的轮状病毒载体蛋白和另一载体蛋白；c)分别将各种荚膜多糖与纳米微球偶联成多糖-纳米微球偶联体；d)再将多糖-纳米微球偶联体分别与轮状病毒载体蛋白和另一载体蛋白偶联结合；e)分离纯化步骤d)所得偶联体成该人用轮状病毒疫苗原液。2CN107412765A说明书1/22页人用轮状病毒疫苗及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及一种疫苗，具体说，是涉及人用轮状病毒疫苗疫苗及其制备方法，属于生物技术领域。背景技术[0002]一、微生物对人体的危害及应对措施[0003]微生物通常是指那些个体体积直径一般小于1mm的生物群体，它们结构简单，大多是单细胞，还有些甚至连细胞结构也没有，我们身边无时无刻不存在着微生物，通常会借助显微镜或者电子显微镜才能看清它们的形态和结构；其中，致病微生物是指能够引起人类、动物和植物的病害，具有致病性的微生物。一种病原体的致病性有赖于它的侵袭宿主并在体内繁殖和抵御宿主抵抗力而不被其消灭的能力。微生物致病性有种属特征，致病能力强弱的程度称为毒力。感染性疾病的成立并非由微生物的毒力单方面决定，还要视宿主的健康情况与免疫功能状态。一般而言，毒力强的微生物感染未曾免疫过的机体，能引起