苏云金芽胞杆菌新型cry9基因克隆、表达及活性分析的任务书.docx

苏云金芽胞杆菌新型cry9基因克隆、表达及活性分析的任务书
任务书
一、任务背景
苏云金芽胞杆菌（Bacillusthuringiensisvar.suantoujingensis）是一种土壤芽孢杆菌，具有广谱杀虫作用。其中的Cry双组分蛋白是一种特殊的杀虫蛋白，具有杀灰飞虱、菜青虫、棉铃虫、玉米螟等多种害虫的作用。然而，由于害虫的抗性不断增强，原有的Cry蛋白需要不断升级改良。
因此，本次任务的目的是对苏云金芽胞杆菌中的一种新型cry9基因进行克隆、表达和活性分析，为生物农药的研发提供有效的资源。
二、任务内容
1.根据已有文献和基因序列，设计合适的引物，对苏云金芽胞杆菌中的cry9基因进行扩增和克隆。
2.将克隆得到的cry9基因插入到适当的表达载体中，构建表达载体。
3.将构建好的表达载体转化到适当的宿主细胞中，进行原核表达。
4.对表达的蛋白进行纯化和活性鉴定，包括SDS-PAGE电泳和WesternBlot检测，以及杀虫活性测定。
三、任务要求
1.根据已有文献和基因序列，进行合理的引物设计，并确保克隆得到的cry9基因的正确性和完整性。
2.构建好的表达载体需要进行检测，确保其完整性和正确性，以及表达效率的高低。
3.根据表达载体构建的宿主细胞，需要进行菌落PCR检测，确保表达蛋白的正确性和多样性。
4.在进行蛋白纯化和活性鉴定时，需要充分考虑样品准备的方法，确保操作规范和检测结果的可重复性。
5.在进行杀虫活性测定时，需要合理的实验设计和样品分析，确保数据的可靠性和误差控制。
四、任务完成时间
本任务的完成时间为2个月。
五、任务报告要求
1.任务报告应包括研究背景、研究目的、研究内容、实验方法、实验结果和结论等方面。
2.报告的格式应符合学术论文的要求，并按照规定时间完成和提交。
3.报告需要扼要介绍每个实验的目的和意义，以及相关的技术细节和数据分析。
4.报告需要明确总结研究成果，以及其对生物农药行业的贡献和发展意义。
六、任务预算
任务预算为5000元，用于实验所需的材料和设备购置，以及实验条件和人力资源的保障。
七、参考文献
1.IbrahimMA,GrikoNB,BullaJrLA(2010)TheCry9BbtoxinfromBacillusthuringiensis:theimportanceofspatialresolutionintheintricatemechanismofporeformation.CellularandMolecularLifeSciences.67:3719–3732.
2.ZhangXXuL,TangG(2018)ResearchprogressandapplicationprospectsofBacillusthuringiensisCrytoxins.BiotechnologyBulletin.34(8):18-27.
3.Brossi-GarciaALetal.(2018)Characterizationofanewcry9CgeneanditstoxiceffectsagainstAedesaegyptilarvae.WorldJournalofMicrobiologyandBiotechnology34(4):1-12.