轮状病毒的热灭活.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107693787A(43)申请公布日2018.02.16(21)申请号201710952526.3(51)Int.Cl.(22)申请日2008.09.04A61K39/15(2006.01)A61K41/00(2006.01)(30)优先权数据A61P31/14(2006.01)60/969,8262007.09.04US(62)分案原申请数据200880110436.92008.09.04(71)申请人美国政府（由卫生和人类服务部、疾病控制和预防中心的部长所代表）地址美国佐治亚州(72)发明人B·江R·I·格拉斯J-F·萨鲁佐(74)专利代理机构北京北翔知识产权代理有限公司11285代理人张广育姜建成权利要求书1页说明书15页附图7页(54)发明名称轮状病毒的热灭活(57)摘要本发明提供热灭活轮状病毒的方法，包括将轮状病毒置于约50℃-80℃、包括50℃和80℃的温度下孵育足够长的时间以使所述轮状病毒不能复制或感染。所述热灭活的轮状病毒具有抗原性并保持基本完整的轮状病毒粒子结构。本发明还提供疫苗组合物和针对轮状病毒对受试者进行接种的方法，包括热灭活轮状病毒的产生和应用。CN107693787ACN107693787A权利要求书1/1页1.一种包含分离的抗原性热灭活轮状病毒颗粒的疫苗组合物，所述热灭活轮状病毒颗粒的特征在于具有选自如下的完整的轮状病毒粒子结构：三层轮状病毒粒子、双层轮状病毒粒子以及三层轮状病毒粒子和双层轮状病毒粒子的组合，所述热灭活轮状病毒颗粒通过如下方式获得：将分离的轮状病毒粒子悬浮在水性缓冲液中，所述水性缓冲液的摩尔渗透压浓度为250-350mOsm，并且包含CaCl2、MgCl2和/或MgSO4，以及1-20％w/v的山梨糖醇，以得到具有完整轮状病毒粒子结构的轮状病毒粒子的起始制剂；将所述轮状病毒粒子的起始制剂在约58℃-67℃、包括58℃和67℃的温度下孵育足够长的时间以使轮状病毒不能复制或感染，从而产生热灭活的轮状病毒制剂，所述制剂是抗原性的并保持起始制剂的完整轮状病毒粒子结构。2.权利要求1的疫苗组合物，其中所述孵育时间为约30分钟-10小时。3.权利要求1的疫苗组合物，其中所述孵育时间为约1-3小时，包括1小时和3小时。4.权利要求1-3中任一项的疫苗组合物，其中所述水性缓冲液为汉克斯平衡盐溶液。5.权利要求1-3中任一项的疫苗组合物，其中所述水性缓冲液由具有1.3mMCaCl2、0.5mMMgCl2和0.4mMMgSO4的汉克斯平衡盐溶液构成。6.权利要求1-5中任一项的疫苗组合物，其中所述水性缓冲液包含10％的山梨糖醇。7.权利要求1-6中任一项的疫苗组合物，还包括一种佐剂。8.权利要求2的疫苗组合物，其中所述佐剂为一种含铝的佐剂，其选自：AlOH、一种铝盐以及它们的组合。9.权利要求8的疫苗组合物，其中所述佐剂为AlPO4。10.权利要求9-10中任一项的疫苗组合物，其被制成用于对受试者肠胃外给药的剂型。2CN107693787A说明书1/15页轮状病毒的热灭活[0001]本申请为分案申请，其原申请的申请日为2008年9月4日，申请号为200880110436.9，名称为“轮状病毒的热灭活”。[0002]相关专利申请的交叉引用[0003]本申请要求2007年9月4日提交的美国临时专利申请No.60/969,826的优先权，所述临时申请的全部内容以引用的方式纳入本文中。技术领域[0004]本发明主要涉及轮状病毒组合物和方法。更具体地，本发明涉及热灭活轮状病毒的方法和灭活轮状病毒疫苗组合物。背景技术[0005]在多种引起儿童严重腹泻的肠道病原性病毒中，轮状病毒是最常见的，它导致每年平均611,000例死亡。几乎所有儿童在5岁前都会被轮状病毒感染。所述病毒被认为是高度传染性的，并被描述为“平等”病毒，因为其感染的影响没有特别的社会经济或地理群的差异。尽管大部分儿童能够获得足够的支持性和缓解性医疗护理，挺过感染而不出现严重的长期后果，然而与严重腹泻、呕吐、脱水和休克有关的死亡数目是不可接受的并在可能的情况下需要预防性治疗。[0006]针对轮状病毒介导的疾病所进行的接种是一种解决这种重大健康问题的方案。目前，尽管已经开发和授权了活的口服疫苗，然而对安全性和效力的持续关注支持用灭活轮状病毒疫苗进行肠胃外接种的替代方法。缺少灭活轮状病毒的有效方法和包含灭活轮状病毒的疫苗组合物。具体的困难为处理活的轮状病毒以在将其灭活的同时保持抗原性，所述抗原性与基本完整的双层和三层轮状病毒粒子相关。[0007]对于灭活轮状病毒的有效方法和包含灭活轮状病毒的组合物有着持续的需要。发明内容[0008]本发明的实施方案提供包含抗原性热灭活轮状病毒的