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IL1Ra-HSA基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达的中期报告 IL1Ra-HSA是一种由人类白细胞介素1受体拮抗剂(IL1Ra)和人血清白蛋白(HSA)融合构建而成的蛋白质。其具有调节白细胞介素1家族细胞因子信号通路的功能,广泛应用于免疫疾病、炎症等医学领域。 本研究旨在进行IL1Ra-HSA基因的克隆,并在毕赤酵母中进行表达、纯化和鉴定。首先,通过基因合成技术,获得了含有IL1Ra-HSA全长序列的合成基因,并进行了限制性酶切和DNA测序验证。 接着,将克隆后的IL1Ra-HSA基因插入到毕赤酵母表达载体pPICZαA中,并转化到毕赤酵母GS115菌株中。通过筛选和PCR鉴定,获得了稳定的推荐菌株,并进行了表达和分析。 在表达优化过程中,我们对菌株进行了发酵培养、诱导表达、蛋白质纯化等步骤。通过Westernblot和SDS-PAGE等实验方法,鉴定了表达的IL1Ra-HSA蛋白质,并确定了适宜的表达条件和纯化方法。 目前,我们已经成功表达和纯化了一定量的IL1Ra-HSA蛋白质,并进行了初步的生物活性测试。进一步的研究将会针对其在免疫疾病和炎症模型中的应用,以及在制备各种药物载体中的潜在应用进行探讨。