一种猪轮状病毒VP6亚单位疫苗.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107875380A(43)申请公布日2018.04.06(21)申请号201711133247.0(22)申请日2017.11.16(71)申请人青岛宏昊生物科技有限公司地址266000山东省青岛市城阳区双元路18号(72)发明人陈艺燕周佩佩(51)Int.Cl.A61K39/15(2006.01)A61P31/14(2006.01)权利要求书1页说明书7页序列表4页附图2页(54)发明名称一种猪轮状病毒VP6亚单位疫苗(57)摘要本发明的提供一种猪轮状病毒VP6亚单位疫苗，其中使用的抗原是其氨基酸序列为SEQIDNO:2的VP6重组表达蛋白。本发明在筛选获得了新型的VP6抗原基因的基础上，重组表达该VP6抗原蛋白，并制成基因工程亚单位疫苗。本发明基因工程亚单位疫苗对猪轮状病毒具有显著的免疫效果。CN107875380ACN107875380A权利要求书1/1页1.一种猪轮状病毒VP6亚单位疫苗，其特征在于，所述的疫苗中使用的抗原是其氨基酸序列为SEQIDNO:2的VP6蛋白。2.如权利要求1所述的亚单位疫苗，其特征在于，所述的编码VP6蛋白的核苷酸片段，其一种序列为SEQIDNO:1。3.如权利要求1所述的亚单位疫苗，其特征在于，所述的亚单位疫苗为氢氧化铝胶苗。4.如权利要求1所述的亚单位疫苗，其特征在于，所述的亚单位疫苗中VP6蛋白的含量优选不少于200μg/ml。5.权利要求1所述的亚单位疫苗在制备预防猪轮状病毒的生物制品中的应用。6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的生物制品为免疫试剂盒。2CN107875380A说明书1/7页一种猪轮状病毒VP6亚单位疫苗技术领域[0001]本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及一种猪轮状病毒VP6亚单位疫苗。背景技术[0002]猪轮状病毒(RV)引起猪腹泻及幼猪死亡,给养殖户带来巨大的经济损失。应用疫苗免疫已经成为降低相关发病率、病死率和减轻经济负担的一个重要途径。养猪场等动物养殖场是该病的其主要疫源地。目前临床主要应用减毒苗来进行防疫,但由于轮状病毒的多型性；以及减毒苗与野毒株基因重组,引起回复突变；养殖动物长期排毒,污染水源、食品；这些因素都给该病的防疫造成巨大困难。近年来国外深入开展了新型轮状病毒疫苗的研究工作,并取得了巨大进展。其中主要为基因工程疫苗的研究，通过基因工程方法表达轮状病毒的抗原，免疫动物或人，从而达到免疫保护的目的。基因工程疫苗主要包括核酸疫苗、合成肤疫苗、重组表达抗原疫苗以及轮状病毒类病毒颗粒(VLP)疫苗等。[0003]但在目前使用的轮状病毒重组抗原亚单位疫苗研究中，由于轮状病毒基因组的多样性，导致制备的疫苗不能有效的预防不同基因背景的轮状病毒。且轮状病毒血清群和血清型众多,且不同毒株的生物学特性不同,故对轮状病毒的分离鉴定及相关特性的研究,无论是对该病毒的基础性研究亦或是对该病的应用性研究均具有十分重要的意义。发明内容[0004]本发明的目的是提供一种猪轮状病毒VP6亚单位疫苗，从而弥补现有技术的不足。[0005]本发明在筛选获得了新型的VP6抗原基因的基础上，重组表达该VP6抗原蛋白，并制成基因工程亚单位疫苗。[0006]本发明所提供的猪轮状病毒VP6亚单位疫苗，其中使用的抗原是其氨基酸序列为SEQIDNO:2的VP6重组表达蛋白[0007]编码VP6重组表达蛋白的核苷酸片段，其一种序列为SEQIDNO:1；[0008]本发明的A亚群禽白血病病毒基因工程亚单位疫苗，为氢氧化铝胶苗；[0009]本发明所提供的亚单位疫苗中，抗原蛋白的含量优选不少于200μg/ml。[0010]本发明在筛选获得了新型的VP6抗原基因的基础上，重组表达该VP6抗原蛋白，并制成基因工程亚单位疫苗。本发明基因工程亚单位疫苗对猪轮状病毒具有显著的免疫效果。附图说明[0011]图1:VP6扩增产物电泳图；[0012]图2：本发明筛选的VP6的blastp的结果图；其中Query为本发明的VP6；[0013]图3：VP6的重组表达产物SDS电泳图。具体实施方式3CN107875380A说明书2/7页[0014]首先对本发明所涉及的术语解释如下：[0015]1、猪轮状病毒(RV)：[0016]轮状病毒(Rotavirus，RV)是呼肠孤病毒科(Reoviridae)，轮状病毒属(Rotavirus)的成员。本属病毒略呈圆形，由11各双股RNA片断组成，有双层衣壳，直径65～75纳米。其中央为核酸构成的核心，内衣壳由32个呈放射状排列的圆柱形壳粒组成，外衣壳为连接于壳粒末端的光滑薄膜状结构，使该病毒形成车轮状外观，故命名为轮状病毒。各种动物和人的轮状病毒内衣壳具有共同的抗原，即群特异性抗原，可用补体结合、