人溶菌酶融合基因在毕赤酵母中的表达研究的中期报告.docx

人溶菌酶融合基因在毕赤酵母中的表达研究的中期报告
该研究旨在将人溶菌酶基因与毕赤酵母的表达系统进行融合，实现对人溶菌酶在毕赤酵母中的表达，并探索其最适表达条件。研究进行了以下几个方面的工作：
一、构建人溶菌酶与毕赤酵母的表达载体
将人溶菌酶基因的编码序列克隆到毕赤酵母的表达载体pPICZαA中，得到重组质粒pPICZαA-hrL。经序列检测确认无误后，转化到毕赤酵母GOLDstrain中，得到重组酵母菌株。
二、探索最适表达条件
在Shakeflask中进行分别不同的条件下的表达，包括温度、pH、诱导剂(甲醇)浓度等等条件对表达的影响。研究结果表明，在30℃、pH6.0、0.5%甲醇浓度下，人溶菌酶的表达量最高。
三、人溶菌酶的酶活性检测
针对表达产物，进行人溶菌酶的酶活性检测。结果表明，酵母表达的人溶菌酶也具有酶活性，且在上述最适表达条件下所表现出的酶活性最高。
综上，该研究成功构建了人溶菌酶在毕赤酵母中的表达系统，并探究了最适表达条件。结果表明，在30℃、pH6.0、0.5%甲醇浓度下，人溶菌酶的表达量和酶活性均较高，为该系统的后续开发提供了基础。