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猪Hepcidin基因在毕赤酵母中的表达及活性研究的中期报告 简介: 本研究旨在通过将猪Hepcidin基因导入毕赤酵母用于表达,并评估其在毕赤酵母中的活性和功能。目前为止,已完成了实验的中期报告,包括构建表达载体、克隆表达菌株和进行表达实验。 方法: 1.构建表达载体:从猪基因组中扩增出Hepcidin基因,并使用PCR技术克隆到表达载体pYES2.1/V5-His中。 2.克隆表达菌株:将表达载体转化到毕赤酵母中,并筛选出正常表达的菌株。 3.进行表达实验:采用酵母表达系统,在不同条件下(如温度、pH值等)进行表达实验,最终通过Westernblot、ELISA和活性测定等方法评估Hepcidin基因在毕赤酵母中的表达水平和活性。 结果: 1.构建了表达载体pYES2.1/V5-His-Hepcidin,成功将猪Hepcidin基因导入毕赤酵母进行表达。 2.筛选出了正常表达的菌株,通过Westernblot和ELISA证实了Hepcidin基因在毕赤酵母中得到了表达。 3.通过活性测定,发现Hepcidin基因在毕赤酵母中呈现出一定的活性,但活性较低。 结论: 本研究初步证实了猪Hepcidin基因在毕赤酵母中的可表达性,但表达水平和活性还需要进一步优化。未来,我们将继续深入研究Hepcidin基因在毕赤酵母中的表达和功能,为其在动物营养学和免疫学等领域的应用提供基础支持。