猪Hepcidin基因在毕赤酵母中的表达及活性研究的中期报告.docx
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猪Hepcidin基因在毕赤酵母中的表达及活性研究的中期报告.docx
猪Hepcidin基因在毕赤酵母中的表达及活性研究的中期报告简介:本研究旨在通过将猪Hepcidin基因导入毕赤酵母用于表达,并评估其在毕赤酵母中的活性和功能。目前为止,已完成了实验的中期报告,包括构建表达载体、克隆表达菌株和进行表达实验。方法:1.构建表达载体:从猪基因组中扩增出Hepcidin基因,并使用PCR技术克隆到表达载体pYES2.1/V5-His中。2.克隆表达菌株:将表达载体转化到毕赤酵母中,并筛选出正常表达的菌株。3.进行表达实验:采用酵母表达系统,在不同条件下(如温度、pH值等)进行表
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猪Hepcidin基因在毕赤酵母中的表达及活性研究猪Hepcidin基因在毕赤酵母中的表达及活性研究摘要:猪Hepcidin基因是与铁代谢有关的重要基因,其表达不足或异常会影响身体的铁代谢平衡。本研究利用毕赤酵母作为表达载体,成功构建了pYES2.1/Hepcidin重组质粒,并将其转化到毕赤酵母中进行表达。结果表明,在诱导条件下,Hepcidin蛋白在毕赤酵母中表达并可成功纯化。进一步的实验表明,Hepcidin可以有效地抑制酵母中的铁吸收,说明其具有活性。本研究为深入探究Hepcidin在铁代谢中的作
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人溶菌酶融合基因在毕赤酵母中的表达研究的中期报告该研究旨在将人溶菌酶基因与毕赤酵母的表达系统进行融合,实现对人溶菌酶在毕赤酵母中的表达,并探索其最适表达条件。研究进行了以下几个方面的工作:一、构建人溶菌酶与毕赤酵母的表达载体将人溶菌酶基因的编码序列克隆到毕赤酵母的表达载体pPICZαA中,得到重组质粒pPICZαA-hrL。经序列检测确认无误后,转化到毕赤酵母GOLDstrain中,得到重组酵母菌株。二、探索最适表达条件在Shakeflask中进行分别不同的条件下的表达,包括温度、pH、诱导剂(甲醇)浓度
Hepcidin20基因克隆及在毕赤酵母中的表达.docx
Hepcidin20基因克隆及在毕赤酵母中的表达引言铁是生命体系中必不可少的微量元素,它在生理过程中扮演着重要的角色,如携氧、能量代谢和DNA合成等。小鼠betaglobin(Hbb)基因处理的肝脏中蛋白质裂解产物的一项研究证明了Hepcidin(锘蛋白)是一个关键性的拮抗家族性铁吸收蛋白质ferroportin活化的肝脏合成多肽。锘蛋白的生物功能即是通过抑制铁吸收和释放肠道中的铁吸收来疏导由铁沉积和过量吸收所引起的毒性代谢反应,从而在机体内维持正常的铁代谢平衡。实验部分本实验的目的是克隆鲤鱼hepcid
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人β-防御素-3在毕赤酵母中的分泌表达及活性研究的中期报告人β-防御素-3(hBD-3)是一种人体天然免疫系统中的重要小分子抗菌肽,在抗菌、抗病毒、抗真菌等方面具有广泛的作用。为了得到足量的hBD-3供研究使用,本次实验旨在将hBD-3基因克隆到毕赤酵母中进行高效的分泌表达,并检测其功能性活性。首先,本实验从人体单核细胞中提取RNA,利用RT-PCR技术扩增得到完整的hBD-3基因,并克隆到pPIC9K载体中。随后,将重组质粒转化到毕赤酵母中进行基因表达。通过SDS-PAGE和Westernblottin