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在毕赤酵母中表达人溶菌酶蛋白的研究在毕赤酵母中表达人溶菌酶蛋白的研究将化学合成的人溶茵酶基因舰hLYZ(444bp)构建到毕赤酵母分泌型表达载体pPICZ上;载体质粒用SacI线性化后电击法转化毕赤酵母菌株GS115.在舍Zeocin的抗性培养基筛选后PCR鉴定获得了9株重组菌株.重组菌株经甲醇诱导后取表达上清液进行SDS-PAGE电泳和Westernblot分析.结果显示,重组hLYZ在毕赤酵母中成功表达,在诱导60h时表达量最高.用镍亲和层析柱纯化重组hLYZ,用Bradford法测得其含量约为324mg·L-1.比浊法活性测定结果显示所表达的重组人溶茵酶活性达到4473U.mL-1.本研究利用毕赤酵母分泌型表达载体成功表达了重组人溶菌酶,并探索了简单有效的纯化和活性测定方法,为利用毕赤酵母系统规模化生产重组人溶菌酶奠定了技术基础.作者:胡乔赵凌侠唐克轩HUQiaoZHAOLing-xiaTANGKe-xuan 作者单位:胡乔,HUQiao(上海交通大学,农业与生物学院,上海,200240;上海交通大学,生命科学技术学院,上海,200240)赵凌侠,唐克轩,ZHAOLing-xia,TANGKe-xuan(上海交通大学,农业与生物学院,上海,200240) 刊名:上海交通大学学报(农业科学版) ISTIC英文刊名:JOURNALOFSHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITY(AGRICULTURALSCIENCE) 年,卷(期):2008 26(3) 分类号:Q786 关键词:人溶菌酶  毕赤酵母  生物活性