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人NGAL原核表达及多克隆抗体的制备的中期报告
本实验的目标是在大肠杆菌中表达并纯化人NGAL蛋白，并制备该蛋白的多克隆抗体。
在前期实验中，我们成功地克隆了人NGAL基因，将其插入大肠杆菌表达载体中，并利用酶切和测序确认了正确的重组质粒。接下来，我们转化了重组质粒进入大肠杆菌并进行表达。经过SDS-PAGE电泳和Westernblot检测，我们证实了目的蛋白在大肠杆菌中成功表达并呈现出预期的分子量。
为了纯化NGAL蛋白，我们进行了多次试验，包括离子交换和亲和层析。然而，我们遇到了一些困难，例如纯化后的蛋白失活或纯化效果不佳，导致我们无法得到足够的纯化蛋白进行下一步的多克隆抗体制备。为了解决这些问题，我们正在继续优化纯化条件，并进行一系列相关实验。
同时，我们已经开始了制备NGAL多克隆抗体的工作。我们根据已表达和纯化的NGAL蛋白，以及商业化的NGAL抗体，设计了多个抗原肽段，并进行了多次免疫小鼠试验。目前，我们正在检测小鼠抗体的特异性和亲和力，并计划进行继续免疫和筛选，以得到高质量的NGAL多克隆抗体。
总体来说，我们在NGAL原核表达及多克隆抗体的制备方面取得了一定的进展，但还有许多工作需要进一步完善和优化。我们将继续努力，以达到预期的研究目的。