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设计作品名称姜黄薄层鉴别方案 一、前言 姜黄为姜科植物姜黄的干燥根茎。冬季茎叶枯萎时采挖,洗净,煮或蒸至透心,晒干, 除去须根,为临床常用中药材。主要功能是破血行气,通经止痛。用于胸胁刺痛,胸搏心 痛,痛经经闭,癥瘕,风湿肩臂疼痛,跌扑肿痛。药材呈不规则卵圆形、圆柱形或纺锤形, 常弯曲,有的具短叉状分枝,长2~5cm,直径1~3cm。表面深黄色,粗糙,有皱缩纹理 和明显环节,并有圆形分枝痕及须根痕。质坚实,不易折断,断面棕黄色至金黄色,角质 样,有蜡样光泽,内皮层环纹明显,维管束呈点状散在。气香特异,味苦、辛。姜黄有多 个产区,不同产区的药材形态上也有一些差异,不法商贩还有参假的现象。单从形状无法 判断姜黄的真伪优劣。 薄层色谱法通过将供试品溶液点于薄层板上,在展开容器内用展开剂展开,使供试品 所含成分分离,最后所得图谱与适宜的标准物质按同法所得的图谱进行对比,操作方便、 设备简单、显色容易,色谱参数易调整,彩色图像表达更直观。同时展开速率快,一般仅 需15~20min;混合物易分离,分辨力也高,它既适用于只有0.01μg的样品分离,又能 分离大于500mg的样品作制备用,而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。 所以通过使用薄层色谱法,比对姜黄色谱图得到的结果,能快速有效的把握药材的质量, 辨别药材真伪。 二、设计依据 中药鉴别的方法有很多种,传统的有基原鉴定,性状鉴定,显微鉴定,理化鉴定。基 原主要是通过生物分类鉴定它的生物学来源,性状则通过品尝、闻嗅、观看、触摸来鉴定 药材,显微就是通过观察药材粉末、药材横切面,找到药材的特征来鉴别,理化是利用中 药所含化学成分的某些物理化学特性对药材进行鉴定。以传统的方法作为一个基础,再加 以一些先进的如薄层色谱、紫外、红外、高效液相、气相等其他更高效的方法,对药材进 行鉴别,是现在大家鉴别的方式,得到的结果数据更严谨,更准确。 1 基于实验中为了提高做事的效率,获得更大的收益,加快实验的进程,同时取得好的 效果,综合考虑,就有了一个适合于实验中鉴别药材,且简单易上手,方便快捷,结果有 保障的薄层色谱鉴别设计。 三、设计方案 参考薄层色谱法的相关资料,对姜黄薄层鉴别方案进行设计。 (一)仪器及材料 1、仪器 JEA602电子天平;XS205DU电子天平,HH-8电热数显恒温水浴锅;WTH-204手提式紫 外分析仪;TDL5台式大容量冷冻离心机;展开缸;锥形瓶;量筒,滴管;硅胶板;离心 管。 2、试剂 姜黄(市售);姜黄素对照品(中国食品药品检定研究院,批号:110823-201706); 无水乙醇(AR)、三氯甲烷(AR)、甲醇(AR)、甲酸(AR)。 (二)薄层鉴别方案 1、姜黄薄层色谱的流程 供试品、对照品溶液制备 制板(买好的薄层板)薄层板活化 配展开剂 点样展开显色 2、制板(硅胶G板) 选用合适的表明光滑平整的玻璃板,称取适量硅胶,加入0.2%-0.5%羧甲基纤维素钠 溶液,按一个方向充分搅拌均匀,进行制板,速度要快,平铺均匀,轻轻振板。一块板含 有3-5g硅胶,硅胶与羧甲基纤维素钠比例(1:2-1:4)。制的玻璃板置于通风橱,自然 干燥后放入烘箱进行活化,活化后,薄层板可放置紫外灯下进行检视,五花斑,水分即可。 3、活化 制好的硅胶板放入烘箱,105℃活化半小时或以上。 4、供试品溶液、对照品溶液的制备 称取制剂中干燥内容物细粉(过40目筛)1g,放入50ml锥形瓶中,加入无水乙醇20ml, 振摇,放置30min,将溶液倒入离心管,放入离心机中,离心5min,取上层滤液于小烧杯 里,置于恒温水浴锅中蒸干,残渣加无水乙醇2ml使溶解,作为供试品溶液。 取姜黄素对照品,加无水乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。 2 5、点样 用定量毛细管进行点样。用铅笔在距硅胶板底部1.5cm处画一条横线,横线上画交叉 点,点与点之间应有1cm左右的间距,点距左右两端至少1cm,吸取上述两种溶液各5μl, 点于交叉点上,斑点不易过大(2mm-5nm),多次少点,可以用吹风机将点在硅胶板上的点 吹干,再继续点样。 6、展开 配制展开剂,以三氯甲烷-甲醇-甲酸(96:4:0.7)为展开剂,配制后,倒入展开缸进 行预饱和,15min左右,饱和后,放入硅胶板,展开,展距有8-12cm时取出,晾干。 7、显色 分别置日光和紫外灯(365nm)下检视。 8、结果 供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。 (三)注意事项 1、对照品-选择姜黄药材的主要活性成分。 2、在点板前,硅胶板需要在105℃活化半小时以上。 3、展开缸-选择直立式双槽的展开缸,能够节省溶剂也便于预平衡;展开缸需干净且 干燥,盖板需涂抹凡士林或其他密封油脂,