大蒜的薄层色谱鉴别研究.docx

大蒜的薄层色谱鉴别研究【摘要】目的研究大蒜的质量控制方法。方法采用TLC法对大蒜药材进行定性鉴别。结果薄层色谱斑点清晰，阴性无干扰。结论该方法简便可行，可用于大蒜的质量控制。【关键词】大蒜；蒜氨酸；薄层色谱鉴别大蒜是百合科Liliaceace葱属植物大蒜AlliumsativumL.的鳞茎，在我国有着悠久的使用历史。大蒜的有效成分为含硫的一系列化合物。大蒜的鳞茎中主要的含硫化合物是S-烯丙基半胱氨酸硫氧化合物——蒜氨酸［1，2］。国内外已上市的大蒜制剂近几十种之多，但各种制剂原料的来源有所不同，而导致制剂质量的差异。为从源头控制大蒜药材质量，本文采用TLC法对大蒜进行定性鉴别。1材料陈蒜：陈蒜1号，陈蒜2号；鲜蒜：独头蒜，山东白皮蒜，山东红皮蒜1，山东红皮蒜2，喀什沙门乡蒜，玛纳斯蒜，英吉沙芒辛乡蒜，新地蒜，老泉子街蒜，半截沟蒜。正丁醇20050420，分析纯，天津市福晨化学试剂厂；正丙醇20050818，分析纯，天津化学试剂三厂；冰醋酸041020，分析纯，西安化学试剂厂；甲醇050719，分析纯，西安化学试剂厂；茚三酮040620，分析纯，上海化学试剂总厂；%茚三酮：称取茚三酮g，50ml无水乙醇溶解，即得。BP211电子天平；SK2200LH超声波振荡仪西贝乐SQ2119C型多功能食品加工机。2方法与结果方法蒜氨酸对照品溶液的制备精密称取蒜氨酸对照品g置于10ml量瓶中，甲醇-水溶解，定容至刻度(每毫升含蒜氨酸对照品1mg)。供试品溶液的制备采用水煮灭活蒜氨酸酶和甲醇灭活蒜氨酸酶法，制备样品，确定样品的制备方法。方法1：去皮蒜10g，甲醇50ml打碎15s，转移至250ml锥形瓶中，加入50ml水，在超声器中超声15min，精密吸取10ml，浓缩至5ml，备用。方法2：去皮蒜10g，水煮10min，加水50ml打碎15s，转移至250ml锥形瓶中，加入50ml水，在超声器中超声15min，精密吸取10ml，浓缩至5ml，备用。展开系统的选择薄层板：硅胶G薄板；展开剂：正丁醇-正丙醇-冰醋酸-水，正丁醇-冰醋酸-水；显色剂：%茚三酮，在105℃加热5min后日光下观察。见图1。蒜氨酸对照品、大蒜样品点样量的选取蒜氨酸对照品(1ml)5，10，3μl点样，确定点样量。大蒜供试品点样量5，10，2μl点样，确定点样量。图1不同制备方法大蒜供试液的薄层色谱图蒜氨酸对照品与3批大蒜样品同板对照蒜氨酸对照品(1mg/ml)点样5μl，大蒜样品点样量2μl对照并验证点样量。12批大蒜样品的薄层色谱图蒜氨酸对照品(1mg/ml)点样量5μl，大蒜样品点样量2μl，进行薄层展开，喷显色剂后观察。结果样品溶液制备的确定通过薄层实验确定水煮灭活蒜氨酸酶和甲醇灭活蒜氨酸酶对大蒜样品溶液的制备差别不大。因此遵从简单、快速的原则，确定大蒜供试液的制备方法为：去皮蒜10g，甲醇50ml打碎15s，转移至250ml锥形瓶中，加入50ml水，在超声器中超声15min，精密吸取ml，浓缩至5ml，备用。点样量的选择点样量的确定：蒜氨酸对照品点样量约为5μl；大蒜供试液点样量约为2μl。色谱见图2～3。图2蒜氨酸对照品薄层色谱图蒜氨酸对照品和大蒜供试液对照确定点样量实验确定蒜氨酸对照品点样量5μl，大蒜样品点样量2μl，蒜氨酸对照品与大蒜样品供试液在同一位置显相同颜色的斑点。见图4。蒜氨酸对照品和大蒜3批样品验证点样量和展开系统实验验证了展开系统：正丁醇-正丙醇-冰醋酸-水、展开系统：正丁醇-冰醋酸-水都较好，蒜氨酸对照品点样量确定为5μl，大蒜供试液点样量确定为2μl。见图5。图3大蒜供试液不同点样量薄层色谱图图4蒜氨酸对照品和大蒜供试液薄层色谱图图5蒜氨酸对照品和3批大蒜供试液薄层色谱图12批大蒜样品薄层色谱图12批大蒜样品均用展开系统：正丁醇-正丙醇-冰醋酸-水、正丁醇-冰醋酸-水展开；蒜氨酸对照品点样量5μl，大蒜12批样品点样量2μl；显色剂为%茚三酮。结果表明，展开系统：正丁醇-正丙醇-冰醋酸-水显色点较深。除此之外无太大差异。从溶剂的配比情况和样品的展开效果，可以选用展开系统正丁醇-冰醋酸-水。见图6～7。图6蒜氨酸对照品和12批大蒜样品供试液薄层色谱图图7蒜氨酸对照品和12批大蒜样品供试液薄层色谱图3讨论通过本实验最终确定：以蒜氨酸为对照品，以甲醇灭活蒜氨酸酶制备样品的供试液，采用正丁醇-冰醋酸-水为展开系统，喷以%茚三酮显色，105℃加热5min后日光下观察，其中确定蒜氨酸对照品的点样量为5μl，大蒜供试液的点样量为2μl，在相同的比移值处，蒜氨酸对照品和大蒜供试液呈现相同颜色的斑点。文中所建的方法简单可行，重复性好，可用于大蒜药材的质量控制。【参考文献】［1］严常开，曾繁典.大蒜的主要化学成分及药理作用研究进展［J］.中国新药杂志，200