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中药大黄的薄层色谱鉴别

[适用对象]生物工程、药学、药物制剂、中药学、制药工程、中药学（国际交流方向）专

业

[实验学时]3学时
一、实验目的

1.掌握CMC-Na硅胶H板对大黄中蒽醌类化学成分的分离。

2.掌握色谱斑点的检出识别方法。

3.计算5中成分的R值和以大黄素为标准的4种成分的R值
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二、实验原理

1.中药大黄中含有5种蒽醌成分，由于取代基不同，引起结构的

极性不同，利用薄层色谱法可将5种成分进行分离，并利用对照品进

行鉴别。

2.由于大黄中成分具有多环共轭体系，因此可通过日光下检视斑

点的黄色和紫外光灯下检视斑点的荧光进行鉴别，此外大黄中成分具

有蒽醌结构还可以用氨熏使之变色进行鉴别。
三、仪器设备

1.仪器：层析缸，玻璃板，毛细管，紫外分析仪

2.试剂：大黄酸水解乙醚提取液，氯仿、石油醚（30-60C）、甲

酸乙酯、甲酸、硅胶H，羧甲基维素钠
四、相关知识点

1.色谱分离的原理是利用组分在固定相和流动相中分配系数的

不同而得到分离

2.薄层色谱中展开剂极性的选择依据

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3.薄层色谱板的制备方法

4.平板色谱的操作程序

5.薄层色谱法进行定性鉴别的依据及色谱斑点的鉴别方法

6.点样方法及注意事项

7.展开时的方法及方法的选择
五、实验步骤

(一)CMC-Na硅胶H板的制备

称取羧甲基纤维素钠（CMC-Na）0.75g于100ml水中，加热使

溶解，混匀，将硅胶H33g加入其中调成糊状。取此吸附剂混悬液适

量放在清洁的饿玻璃板上（710cm板铺板），晃动玻璃板，使其均匀

流动布满整块玻璃板上，而获得均匀的薄层。将玻璃板凉干，在于

110C活化1小时，储存于干燥器中备用。

(二)点样

将薄层板平放在水平面上，用毛细管吸附少量提取液点在离板底

断约1-2cm位置处。要注意点样方法。

(三)饱和

将调好极性的展开剂倒入层析缸中，密闭15min，形成展开剂的

饱和蒸气压。

（四）展开

将点好样的薄层板放入层析缸内进行展开。采用倾斜上行展开

法，展开剂：石油醚（30-60C）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1），展距

15cm。然后取出薄层板在空气中凉干。注意在本实验中的展开方法。

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（五）色谱鉴别

1）日光下检视黄色斑点。

2）置薄层板于密闭的氨水中熏10分钟，斑点应为红色。

3）置氨熏后的薄层斑点于365nm紫外光灯观察斑点的荧光颜色。

（六）计算R值。
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量取斑点和展开剂的迁移距离并计算R值和R值
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六、实验报告要求

要求有原始数据，薄层板展开后的模拟图，实验时间，实验注意

事项，实验合作人
七、思考题

1.如何将分离得到的5种成分按极性大小进行排列

2.如果要将本实验分离得到的5个斑点鉴别分别是什么化合物，

应如何进行。

3.展开剂的极性如何进行选择

4.在薄层色谱法中的展开中可以有那些展开方法，展开过程中

应注意些什么？

5.点样时要注意写些什么？在展开时如何防止拖尾及前倾？
八、实验成绩评定办法

实验成绩的评定包括实验操作（包括薄层板的制备、点样操作、

展开方法、展开剂极性的调节、展开后斑点的分布情况、点样位置、

斑点鉴别方法、斑点和展开剂迁移距离及R值和R值的计算以及卫
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生情况等9个小项）和实验结果（包括实验结果的准确性主要是分离

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后的斑点的数目及斑点的形状）。

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