铜绿假单胞菌.ppt

非发酵菌(NonfermentativeBacilli)
定义----一群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利
用葡萄糖的需氧或兼性厌氧的革兰阴
性无芽胞杆菌

发酵型氧化型产碱型概述非发酵菌分离率假单胞菌科：根据rRNA-DNA同源性分为5个rRNA群
rRNAⅠ群/假单胞菌属rRNAⅡ群/伯克菌属rRNAⅢ群/丛毛单胞菌属、食酸菌属rRNAⅣ群/短波毛单胞菌属rRNAⅤ群/窄食单胞菌属其它：鞘氨醇单胞菌属、希瓦菌属等假单胞菌属Pseudomonas假单胞菌属Pseudomonas各种菌产生的色素抵抗力：较强，对多种抗生素耐药
临床意义：分布广泛，条件致病菌，
主要引起皮肤粘膜受损部位感染和各种医院内感染各种标本

血平板和Mac平板

可疑菌落

涂片革兰染色
革兰阴性杆菌氧化酶(+)、OF：O

非发酵菌鉴定系统鉴定到种

微生物检验程序药敏试验
假单胞菌属和不动杆菌属可做K-B法药敏试验，嗜麦芽窄食单胞菌只有3种药物的K-B法药敏标准，其余需用稀释法或Etest法抗生素敏感试验：

A组：头孢他啶、美洛西林或替卡西林、哌拉西
林、庆大霉素
B组：头孢吡肟、头孢哌酮、氨曲南、亚胺培
南、阿米卡星、妥布霉素、环丙沙星
C组：头孢噻肟或头孢曲松、氯霉素、奈替米星
U组：羧苄西林、头孢唑肟、四环素、诺氟沙星
或氧氟沙星、磺胺甲基异恶唑
铜绿假单胞菌
P.aeruginosa形态：G-b菌体长短不一球杆状或长丝状
单端单鞭毛动力+无芽胞
特性：专性需氧营养要求不高
35℃+4℃－42℃+
可形成多种不同形态的菌落
产多种色素(主要为绿脓素、荧光素)
生化反应：
氧化酶+OF：O硝还+N2+
液化明胶+枸橼酸盐+精双水解+
乙酰胺酶+吲哚-革兰染色电镜图抗原：O抗原(外膜蛋白-保护性抗原
脂多糖-型特异性)
H抗原
血清学分型
抵抗力：抵抗力强耐干燥不耐热
多重耐药
在室温水中长期生存4℃不生长

致病性
广泛存在环境中的条件致病菌，是院内感染
主要病原菌
可引起皮肤感染、呼吸道感染、泌尿道感染、
烧伤感染、囊性纤维变性等
有多种毒力因子：包括菌毛、荚膜多糖、内
毒素、外毒素、绿脓菌素、蛋白酶、磷脂酶等粘附素：菌毛的神经氨酸酶分解上皮细胞表面的神经氨酸促进细菌侵入
荚膜：多糖类物质抗吞噬细胞的吞噬作用；使细菌锚泊在细胞表面，与呼吸道感染有关
内毒素、外毒素
绿脓菌素：绿色色素，由铜绿假单胞菌的RpoS基因编码产生的代谢产物，具有氧化还原活性的化合物，能催化超氧化物和过氧化氢产生有毒氧基团，引起组织损伤。在致病中起重要作用
弹性蛋白酶：降解弹性蛋白，引起肺实质损伤和出血；降解补体和白细胞蛋白酶抑制物；可与相应抗体形成复合物，沉积于感染组织中
磷脂酶C微生物检验脓液痰尿液等

血液环境用品
分离培养直接涂片染色
肉汤增菌血平板
37℃18-24h
可疑菌落（金属光泽、β-溶血、产绿色素、特殊气味）

初步鉴定最后鉴定
菌落色素非发酵菌鉴定系统鉴定
革兰阴性杆菌氧化酶(+)血清分型
检验程序

分离培养鉴定细菌耐药机制

外膜通透性降低
产生灭活酶或钝化酶
主动外排系统将抗生素泵出胞外
抗菌药物作用靶位改变
膜孔蛋白突变
生物膜屏障作用

各种抗生素治疗铜绿假单胞菌所致感染过程中都可能发生耐药。初代敏感菌株在治疗3－4天后可能发生耐药，有必要重复分离菌株
本菌对多种抗生素天然耐药，常用三代头孢和氨基糖苷类联合治疗鉴定结果分析
从临床标本中分离出来的铜绿假单胞菌，需要排除污染因素
铜绿假单胞菌下呼吸道感染需连续三次痰培养阳性才能确立。
典型型
大肠菌样型
粘液型
侏儒型
粗糙型侏儒型（麦康凯平板）典型型（麦康凯平板）典型型（普通平板上）粗糙型（麦康凯平板）大肠型（麦康凯平板）常见非发酵菌初步分群鉴定