水果、蔬菜中16种有机氯残留农药的毛细管气相色谱测定法.doc

有机氯类农药急性毒性较小，但性质稳定，轻易造成残留。目前，世界各国对水果、蔬菜中有机氯农药残留量都作了严格的限量要求[1]。水果、蔬菜中六六六、DDT或其它单个残留有机氯农药的测定，国内已建立了标准方法[2]，但同时对多种（13种以上）有机氯农药残留量检测的研究甚少。季玉玲、张乔等[3]用填充柱气相色谱法测定了水中的六六六等6种有机氯含量；周昱，庄无忌[4]以HP－50＋大口径毛细管柱为分离柱，GC－ECD（电子捕捉检测器）测定了水果中14种有机氯农药残留量，是目前国内能同时检测有机氯农药种类最多的分析方法，但仍不能满足实际需要。国外研究者多采用填充柱或毛细管柱气相色谱测定法，其中Torreti等[5]用DB－1701毛细管柱结合电子捕捉检测器分析了动物饲料中15种有机氯杀虫剂的含量，但他们大多存在前处理操纵繁琐的缺点，有的需要借助较复杂的多维色谱系统[6]，测定方法难以推广应用。本文采用混合溶剂提取、柱层析技术净化方式结合带电子捕捉检测器的气相色谱法成功地分离、检测了16种有机氯农药残留量，该方法简便快速，正确灵敏。1实验部分1.1主要仪器和试剂仪器：HP6890GC仪，配ECD；HP3396色谱数据处理机；HITACHICT6D高速离心机；EYELA真空旋转蒸发器；振荡器；MT－51匀质器。试剂：丙酮、石油醚均为AR级，石油醚需加进少量NaOH重蒸；无水硫酸钠，650℃灼烧4h，冷却后，储于密闭容器中；氟罗里硅土，Fluka进口分装，粒度0.25mm～0.18mm，650℃灼烧6h，冷却后储于密闭容器内备用，使用前于130℃活化4h。α－六六六、β－六六六、γ－六六六、δ－六六六、六氯代苯、对，对－滴滴依、邻，对－滴滴滴、邻，对－滴滴涕、对，对－滴滴涕、七氯、艾氏剂、环氧七氯、硫丹(Ⅰ)、狄氏剂、异狄氏剂、三氯杀螨醇等16种有机氯农药由DIKMA公司提供，纯度均大于99.0％(w)，用石油醚配制并稀释成适用含量的混合标准工作液。1.2分析步骤1.2.1样品的提取与净化水果、蔬菜类样品置于组织捣碎机中高速捣碎，作为试验样品。称取该样品20.00g于250mL具塞三角烧瓶中，加进100mL石油醚－丙酮（V石油醚∶V丙酮=4∶1），振荡30min。用布氏漏斗抽滤，以20mL×2石油醚洗涤残渣，滤液合并于500mL分液漏斗中，以20g/L硫酸钠水溶液(50mL×2)洗涤以除往丙酮。上层石油醚经无水硫酸钠脱水收集于250mL鸡心瓶中，在旋转蒸发器上浓缩至约5mL。在2cm(ID)×25cm玻璃层析柱中，于底部加少许玻璃棉，依次加进1cm高的无水硫酸钠，5gFlorisil和1cm无水硫酸钠。先以40mL无水乙醚－石油醚液（V无水乙醚∶V石油醚=15∶85）预洗柱子，弃掉淋出液。把浓缩的样液移进柱内，以5mL×2石油醚洗样液浓缩瓶，一并移进层析柱，最后以200mL上述含量的无水乙醚－石油醚液洗脱，收集全部洗脱液，于40℃水浴上减压蒸至约40mL，以石油醚定容至50mL，供色谱分析。1.2.2色谱条件色谱柱：HP－10150m×0.32mm(id)×0.33μm(film)弹性石英毛细管柱；载气：高纯氮气；线速度100℃时22cm/s；柱前压75kPa，恒压方式；尾吹N2：60mL/min；进样温度250℃，检测器温度300℃；采用不分流进样方式，进样量1μL，进样0.75min后吹扫。柱温程序：柱温100℃，恒温4min以后以8℃/min的速率程序升温至240℃，继续恒温20min至样品全部流出。1.2.3定性、定量方法采用标准农药样品的保存时间定性，外标法峰面积定量。2结果与讨论2.1色谱分离情况本实验采用HP－101弹性石英毛细管柱为分离柱，在上述色谱条件下，同时测定了柑桔、黄瓜样品中16种残留的有机氯农药。图1为添加一定量有机氯农药的柑桔样品的色谱分离图。图1加已知量的有机氯农药的柑桔样品的色谱图Fig.1Chromatogramofspikedorangesample1．α－六六六(α_HCH)；2．六氯苯(HCB)；3．β－六六六(β_HCH)；4．γ－六六六(γ_HCH)；5．δ－六六六(δ_HCH)；6．七氯(heptachlor)；7．三氯杀螨醇(dicofol)；8．艾氏剂(aldrin)；9．环氧七氯(heptachlorepoxied)；10．硫丹Ⅰ(endosulfanⅠ)；11．滴滴依(p,p′_DDE)；12．狄氏剂(dieldrin)；13．异狄氏剂(endrin)；14．滴滴滴（p,p′_DDD）；15．邻，对－滴滴涕（o,p′_DDT）；16．对，对－滴滴涕（p,p′_DDT）2.2净化方法选择有机氯农药残留量分析的净化方法主要有浓硫酸磺化法、柱层析法、液－液分配法等。液－液分配法净化效果往往不理想，