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(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114957508A(43)申请公布日2022.08.30(21)申请号202210854670.4(22)申请日2022.07.17(71)申请人梁军地址150000黑龙江省哈尔滨市香坊区和平路24号黑龙江中医药大学药学院(72)发明人夏永刚梁军刘俊希姜思亮饶子豪(74)专利代理机构北京思元知识产权代理事务所(普通合伙)11598专利代理师余光军(51)Int.Cl.C08B37/00(2006.01)A61K31/715(2006.01)A61P11/00(2006.01)权利要求书2页说明书9页附图8页(54)发明名称从黑木耳中分离的单体多糖及其制备方法和用途(57)摘要本发明公开了从黑木耳中分离的单体多糖及其制备方法和用途。所述单体多糖由木糖、葡萄糖醛酸、半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成。本发明进一步提供了从黑木耳中分离获得所述单体多糖的结构及制备方法,组合运用多个色谱技术,具有适合大规模生产、成本低、单体多糖产率高和纯度高等特点。本发明所分离的黑木耳单体多糖是高乙酰基葡萄糖醛酸木半乳葡甘聚糖,能够降低性SiO2粉尘致矽肺模型小鼠肺部灌洗液中嗜酸性粒细胞、中性粒细胞及淋巴细胞百分比,明显降低SiO2粉尘致矽肺模型组中SOD、HYP、IL‑6、TNF‑α等氧化、炎症因子水平并呈现剂量依赖性,对实验性SiO2粉尘致矽肺模型小鼠具有保护作用,在防治矽肺方面具有应用前景。CN114957508ACN114957508A权利要求书1/2页1.一种从黑木耳中分离获得的单体多糖,其特征在于,所述单体多糖为高乙酰基葡萄糖醛酸木半乳葡甘聚糖,其分子量为260kDa;乙酰基含量18%;由木糖、葡萄糖醛酸、半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成;其中,按照理论组成摩尔比计,木糖:葡萄糖醛酸:半乳糖:葡萄糖:甘露糖=3:4:1:1:11。2.根据权利要求1所述的单体多糖,其特征在于,所述单体多糖的糖残基连接组成为:→3)‑甘露糖‑(1→、→2,3)‑甘露糖‑(1→、→2,3,6)‑甘露糖‑(1→、→3,6)‑甘露糖‑(1→、甘露糖‑(1→、葡萄糖‑(1→、葡萄糖醛酸‑(1→、木糖‑(1→、半乳糖‑(1→;按照理论糖残基连接组成比计:→3)‑甘露糖‑(1→:→2,3)‑甘露糖‑(1→:→2,3,6)‑甘露糖‑(1→:→3,6)‑甘露糖‑(1→:甘露糖‑(1→:葡萄糖‑(1→:葡萄糖醛酸‑(1→:木糖‑(1→:半乳糖‑(1→=3:1:3:3:1:1:4:3:1。3.根据权利要求1所述的单体多糖,其特征在于,所述单体多糖的化学精细结构重复单元如下所示:4.一种从黑木耳中分离获得权利要求1‑3任何一项所述单体多糖的方法,其特征在于,包括:(1)以水为提取溶剂采用加热回流提取方法提取得到黑木耳水提液;(2)将黑木耳水提液用大孔树脂柱吸附,通过树脂吸附除去色素和蛋白后用洗脱液洗脱得到黑木耳大孔树脂水洗脱液;(3)将黑木耳大孔树脂水洗脱液采用超滤或者透析袋透析处理获得黑木耳精制总多糖;(4)黑木耳精制总多糖通过柱色谱处理得到黑木耳精制多糖I,再使用阴离子交换凝胶柱纯化获得精制单体多糖。5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(2)中所述的大孔树脂柱为AB‑8型大孔树脂;所述的洗脱液为蒸馏水,蒸馏水洗脱量为6倍柱体积。6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(3)中用3kDa超滤色谱柱对大孔树脂洗脱液进行截留处理获得黑木耳精制总多糖。7.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(4)中将黑木耳精制总多糖先使用Amber‑liteFPA90‑Cl‑阴离子交换树脂处理得到黑木耳精制多糖I,再使用DEAE‑650M阴离子交换色谱柱细分纯化得到精制单体多糖。8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,将黑木耳精制总多糖先使用Amber‑liteFPA90‑Cl‑阴离子交换树脂得到黑木耳精制多糖I时分别用蒸馏水和1mol/LNaCl洗脱,其中,蒸馏水和1mol/LNaCl洗脱体积分别为4倍柱体积和2倍柱体积,收集蒸馏水洗脱部分得到黑木耳精制多糖I;使用DEAE‑650M阴离子交换色谱柱细分纯化得到精制单体多糖时,其中,洗脱液为蒸馏水和0.5mol/LNaCl,收集0.5mol/LNaCl洗脱部分得精制单体多糖。2CN114957508A权利要求书2/2页9.权利要求1‑3任何一项所述单体多糖在制备预防或治疗矽肺的药物中的用途。10.一种防治矽肺的药物组合物,其特征在于,由治疗上有效量的权利要求1‑3任何一项单体多糖和药物制剂上可接受的辅料或载体组成。3CN114957508A说明书1/9页从黑木耳中分离的单体多糖及其制备方法和用途技术领域[0001]本发明涉及单体多糖,尤其涉及从黑木耳中分离的单体多糖及其制备方