蔬菜中维生素C含量测定.ppt

实验五蔬菜中维生素C含量测定维生素C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以又称作抗坏血酸。维生素C广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑桔等食品中含量尤丰富。
维生素C具有较强的还原性，对光敏感，氧化后的产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性。进一步水解则生成2，3-二酮古乐糖酸，失去生理作用。
根据它具有的还原性质可以测定维生素C的含量。常用的测定方法有：
（1）2，6-二氯靛酚法（还原型VC）
（2）2，4-二硝基苯肼法（总VC）
（3）碘酸法
（4）碘量法
（5）荧光分光光度法【目的】
1．了解蔬菜中维生素C测定的原理。
2．掌握定量测定蔬菜中维生素C的基本操作技术。
【原理】
用活性碳使样液中的还原型抗坏血酸氧化成脱氢型抗坏血酸，然后使之与2,4-二硝基苯肼偶联生成红色的脎。脎的生成量与样液中总抗坏血酸量成正比。将脎溶于硫酸后进行比色定量。样品分析
（1）样品提取
取西红柿100g，放料理机中，加2%草酸100ml，制成匀浆。
称取匀浆4g,用1%草酸稀释、定容至100ml容量瓶中，过滤。
（2）氧化
取上述滤液25ml于150ml锥形瓶中，加活性碳0.5g,振摇1min，过滤，滤液备用。（3）脎的形成

取试管2支按下表操作。（4）脎的溶解
各管置冰水浴中，分别滴加85%硫酸2.5ml，边加边振动。加完后从冰水中取出室温放置30min，在490nm波长下进行比色，以空白管调零，测样品管吸光度值。
2、标准曲线制备
（1）氧化取标准抗坏血酸应用液25ml于100ml锥形瓶中，加活性碳0.5g，振摇1min,过滤。取滤液10ml于100ml容量瓶中，用1%草酸稀释至刻度(含抗坏血酸10μg/ml)。
（2）脎的形成取试管5支，按下列顺序操作。
2、标准曲线制备
（3）脎的溶解
各管置冰水浴中，分别滴加85%硫酸2.5ml，边加边振动。加完后从冰水中取出室温放置30min，在490nm波长下进行比色，以0号管调零，测定各管吸光度值。以吸光度值为纵座标，抗坏血酸含量（μg）为横座标绘制标准曲线。根据样品管吸光度值查得样品中抗坏血酸含量。式中：
X—样品中总抗坏血酸含量，mg/100g
C—样品管中相当于标准抗坏血酸的量，μg
W—用于测定样液中所含样品量，g

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