烟草及烟草制品中总植物碱的测定.doc

BRAN+LUEBBE 方法No.G-264-01Rev.0(MT24)

烟草及烟草制品中总植物碱的测定
Coresta/ISO方法

测量范围：0-200至0-1600mg/L(以烟碱计)

原理：
本方法应用于烟草及烟草制品中。用水萃取烟草样品，萃取液中的总植物碱(以烟碱计)与对氨基苯磺酸和氯化氰反应生成棕色产物用比色计在460nm比色测定。其中氯化氰是由氯化钾和氯胺T在线反应产生（见附录1）。

此方法的多功能测试模块可同时用于测定氯、氨和硝酸盐。

硬件：12英吋透析器、37℃加热池（7.7ml）。 泵管：9试剂+2空气+1进样器冲洗

使用标准水和AA3比色计的特性数据（0-1600mg/L）：

样品速率50/hr样品：清洗比3:1试剂吸收0.04-0.08灵敏度(吸光度1600mg/L)0.5变异系数：半峰高重复10次1.4%合并标准偏差（50个随机样品，5级校准）4.1mg/L相关系数（线性，5点）0.9998
注：以上性能数据需使用Bran+Luebbe公司的零部件和消耗品。

参考文献：1.CORESTA建议方法No.35。
2.ISO方法No.15153。

原料表:除非特殊说明，所有试剂应为分析纯或同等纯度。水应为蒸馏水或同等纯度的水。
安全分类
Brij-35*,30%溶液（Bran+Luebbe备件号T21-0110-06）--
柠檬酸，C6H8O7·H2O --
氯胺T，C7H7ClNNaO2S·3H2O 有害
硫酸亚铁，FeSO4·7H2O 有害
酒石酸氢烟碱，C10H14N2(C4H6O6)·2H2O 毒
氰化钾，KCN 剧毒
碳酸钠，Na2CO3 刺激性
氯化钠，NaCl --
磷酸氢二钠，Na2HPO4 --
硼砂，Na2B4O7·10H2O --
对氨基苯磺酸，C6H7NO3S --

试剂配制:

缓冲溶液A
氯化钠 2.35g
硼砂7.6g
蒸馏水至1000ml
Brij-35，30%1ml
将2.35g氯化钠和7.6g硼砂溶于约400ml蒸馏水中，转移至1000ml容量瓶中用蒸馏水定容。混合均匀。再加入1mL30%Brij-35溶液。混合均匀。溶液保持清澈透明即可使用。

缓冲溶液B
磷酸氢二钠26g
柠檬酸10.4g
对氨基苯磺酸7g
蒸馏水至1000ml
Brij-35，30%1ml
将26g磷酸氢二钠、10.4g柠檬酸和7g对氨基苯磺酸溶于约500ml蒸馏水中，转移至1000ml容量瓶中用蒸馏水定容。加入1ml30%Brij-35溶液。若溶液混浊须过滤。溶液保持清澈透明即可使用。

氯胺T溶液
氯胺T8.65g
蒸馏水至500ml
将8.65g氯胺T溶于约200ml蒸馏水中，转移至500ml容量瓶中用蒸馏水定容。混合均匀。使用前须用whatman40号(或同等)滤纸过滤。溶液储存于冰箱中。保质期5天。

氰化物解毒液A
柠檬酸1g
硫酸亚铁10g
蒸馏水至1000ml
将1g柠檬酸和10g硫酸亚铁溶于400ml蒸馏水中，转移至1000ml容量瓶中用蒸馏水定容。混合均匀。

氰化物解毒液B
碳酸钠10g
蒸馏水至1000ml
将10g碳酸钠溶于600ml蒸馏水中，转移至1000ml容量瓶中用蒸馏水定容。混合均匀。

氰化钾溶液
警告：氰化钾有剧毒。见安全防护措施。
氰化钾2g
蒸馏水至500mL
在通风橱中，称量2g氰化钾置于一1000ml烧杯中，加入500ml蒸馏水并搅拌至固体溶解（磁力搅拌）。储存于棕色瓶中。

萃取液，5%
冰醋酸50ml
蒸馏水至1000ml
将50mL冰醋酸溶于约600mL蒸馏水中，转移至1000ml容量瓶中用蒸馏水定容。混合均匀。

取样器清洗液
采用萃取液作为取样器清洗液。

系统清洗液
Brij-35，30%1ml
蒸馏水至1000ml
将1mL30%Brij-35溶液加入一升蒸馏水中混合均匀。

标准溶液
按照CORESTA建议方法No.39检验酒石酸氢烟碱的纯度，本方法也可用已知纯度的烟碱或烟碱盐来校准。实际使用过程中的酒石酸氢烟碱用量须按校准结果进行换算。
如果用5%的醋酸作萃取液，则配制标准溶液时也应使用5%的醋酸，取样器清洗液也与此相同。

标准稀释液
采用5%醋酸溶液或0.04mol/L的硫酸溶液。样品萃取液、取样器清洗液和标准稀释液必须相同。

标准储备液，1.6g/L烟碱
酒石酸氢烟碱1.3g
标准稀释液至250mL
将经准确称量(精确至0.0001g)的酒石酸氢烟碱1.3g溶于蒸馏水，转移至250mL容量瓶中定容。此溶液烟碱浓度约为1.6mg/mL。溶液储存于冰箱中。保质期1月。

标准工作溶液
按需