201180030933X用于扩增和稳定天然调节性T细胞的方法和组合物.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN102971416B
(45)授权公告日2018.03.30
(21)申请号201180030933.X(72)发明人S.G.郑D.A.霍尔维奇J.王
(22)申请日2011.04.21(74)专利代理机构中国专利代理(香港)有限公
(65)同一申请的已公布的文献号司72001
申请公布号CN102971416A代理人关立新万雪松
(43)申请公布日2013.03.13(51)Int.Cl.
C12N5/0783(2010.01)
(30)优先权数据A61K35/17(2015.01)
61/3269072010.04.22US
(56)对比文件
(85)PCT国际申请进入国家阶段日US20090257988A1,2009.10.15,
2012.12.21WangJ等.Denovogenerationand
(86)PCT国际申请的申请数据enhancedsuppressionofhumanCD4+CD25+
PCT/US2011/0334842011.04.21regulatoryTcellsbyretinoicacid..
(87)PCT国际申请的公布数据《JournalofImmunology》.2009,第183卷(第6
WO2011/133808EN2011.10.27期),4119-4120.
(73)专利权人南加州大学审查员刘树柏
地址美国加利福尼亚州权利要求书2页说明书14页附图13页
(54)发明名称
用于扩增和稳定天然调节性T细胞的方法和
组合物
(57)摘要
本发明针对用于扩增和稳定天然调节性T细
胞的表现型的方法和组合物。具体来讲，本发明
提供用于处理天然调节性T细胞，使所述细胞抵
抗存在于炎症环境中的因子并且稳定所述细胞
的抑制性质的方法和组合物。
CN102971416B
CN102971416B权利要求书1/2页

1.一种扩增天然调节性T细胞(nTreg)的方法，所述方法包括用调节性的组合物处理包
含纯度大于99%的CD4+CD25+nTreg的细胞培养物，其中所述调节性的组合物包含0.01至20μ
M的全反式维甲酸(atRA)或其它维生素A衍生物。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述维生素A衍生物为全反式维甲酸(atRA)。
3.如权利要求1所述的方法，其中所述调节性的组合物包含0.1至2.0μM的全反式维甲
酸(atRA)。
4.如权利要求1所述的方法，其中所述维生素A衍生物为合成类视黄醇。
5.如权利要求4所述的方法，其中所述合成类视黄醇为Am80。
6.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述调节性的组合物进一步包含细胞因
子。
7.如权利要求6所述的方法，其中所述细胞因子为TGF-β。
8.如权利要求1所述的方法，其中所述调节性的组合物进一步包含IL-2。
9.如权利要求1所述的方法，其中所述调节性的组合物进一步包含T细胞激活因子。
10.如权利要求9所述的方法，其中所述T细胞激活因子为选自抗CD3、抗CD28或抗CD3和
抗CD28的组合的成员。
11.如权利要求1所述的方法，其中所述调节性的组合物进一步包含防止编码转录因子
的基因甲基化的试剂。
12.如权利要求11所述的方法，其中所述试剂为甲基转移酶抑制剂，所述转录因子是
FOXP3。
13.如权利要求12所述的方法，其中所述甲基转移酶抑制剂为氮杂胞苷。
14.如权利要求1所述的方法，其中所述调节性的组合物进一步包含是组蛋白脱乙酰酶
抑制剂的试剂。
15.如权利要求14所述的方法，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自曲古抑菌素A、
ppARγ激动剂和丙戊酸的成员。
16.一种稳定nTreg的表现型的方法，所述方法包括用调节性的组合物体外处理纯度大
于99%的CD4+CD25+nTreg，其中所述调节性的组合物包含0.01至20μM的atRA。
17.如权利要求16所述的方法，其中所述调节性的组合物包含0.1至2.0μM的atRA。
18.如权利要求16所述的方法，其中所述稳定包括使所述nTreg抵抗Th17转化。
19.如权利要求16所述的方法，其中所述稳定包括在炎症环境中保持nTreg表现型。
20.如权利要求19所述的方法，其中所述nTreg表现型包括选自表达FOXP3、抑制活性及
其组合的方法。
21.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞培养物经受流式细胞术以在所述用所述调
节性的组合物处理之前和/或之后富集FOXP3+细胞。
22.一种降低与nTreg中的炎症响应相关的转录因子表达的方法，所述方法包括用包含
0.01至20μM的atRA的调节性的组合物体外处理纯度大于99%的CD4+CD25+nTreg。
23.处理的nTreg在制备