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大肠菌群检测MPN法与平板计数法比较！

GB4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠
菌群计数》中规定了大肠菌群计数的MPN法与平板计数法，
那这两种方法怎么选择以及有什么区别呢？今天小编就跟大
家安利一下~

二者范围不同：

GB4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》范
围中规定：“本标准第一法适用于大肠菌群含量较低的食品中大肠菌群的
计数；第二法适用于大肠菌群含量较高的食品中大肠菌群的计数。”这里

所说的含量高低通常以100CFU为准，即含量低于100CFU采用MPN
法，含量高于100CFU采用CFU法。

概念不同：

•MPN（mostprobablenumber）法：即最近似数法，也称为最可能数法，

是食品检验中常用的方法。1915年，McCrady首次发表了用MPN法(最
大可能数法)来估算细菌浓度的方法，这是一种应用概率理论来估算细菌
浓度的方法。

•平板计数法(colonyformingunits）：CFU即菌落形成单位，样品经过处
理培养后我们数出平板上所生长出的菌落个数，从而计算出每毫升或每克

待检样品中可以培养出多少个菌落，以CFU/ml或CFU/g报告之。

•滤膜法（membranefiltermethod）：将一定量水样注入已灭菌的微孔薄
膜的滤器中，经过抽滤，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴于培养基上，经
培养后计数和鉴定滤膜上生长的菌落，依据过滤水样计算每升或每100毫
升水样中的菌落总数。

•菌落：是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长

物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。

原理不同：

•MPN法：利用待测微生物的特殊生理功能的选择性来摆脱其他微生物类
群的干扰，并通过该生理功能的表现来判断该类群微生物的存在和丰度。

因为细菌在样本内的分布是随机的，所以检测细菌时，可应用概率理论计

算菌数，实验结果以MPN值表示，但MPN值并不能表示实际菌落
数，实际菌落数有可能落在置信区间内的任何一点，MPN值是落在这个
置信区间内概率最大的一点。
举例说：稀释度为0.01，0.001，0.0001所对应的阳性管数分别为2-0-0；

查MPN检索表可知：
MPN值为92CFU/ml(g),当置信度为95%，则其下限和上限分别为14，

380，即对应的菌落浓度区间为14~380CFU/ml(g)，意思是：这个检验结
果显示细菌浓度落在14-380CFU/ml(g)区间均有可能，只不过92
CFU/ml(g)出现的概率最大，概率为31.9%.

平板计数法：平板菌落计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个
菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的,也就是说一个菌落即代表一个
单细胞。计数时,先将待测样品作一系列稀释,样品经适当稀释后，其中的
微生物充分分散为单个细胞，取一定量的稀释液接种到平板上，经过培
养，由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代
表原样品中的一个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即
可换算出样品中的含菌数。

滤膜法：在压力差的作用下，悬浮液中的液体（或气体）透过可渗性介质

（过滤介质），直径大于网孔直径的菌体为介质所截留，从而实现样品和
菌体的分离。然后将滤膜放在适当的培养基上进行培养，菌体可直接在膜
上生长，从而可直接计数。

MPN优缺点

优点：操作简便、灵敏度较高，时间短，可直接观察试管得出结论，每个
接种稀释度均有重复，重复次数越多，误差就会越小。

缺点：要求样品具有均一性，适合检验液体样品，且只能用于检验在发酵
培养基中产气的菌种。

注意事项：需选择合适的稀释度和接种量。

平板计数法优缺点

优点：
1、能测出样品中的活菌数，直观，能够直接读数
2、平板菌落计数法通常做梯度稀释，所以计数的线性范围大。
3、由于是菌悬液倾注或涂布，所以比较均匀，能较好的反应菌落的疏密
程度。
4、灵敏，平行性较好。

缺点：
1、手续较繁，而且测定值常受各种因素的影响。
2、厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，比较难检
测出。
3、菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧
菌数等。

4、长成的一个单菌落也可能来自样品中的2～3或更多个细胞。因此平板
菌落计数的结果往往偏低。
5、检验时间长。

注意事项：
样品需要充分均匀以及选择合适稀释度和接种量，检验过程必须严格无
菌，以防污染杂菌。

滤膜法优缺点

优点：
1、可以检测大量的样品。
2、浓缩效应使微生物检测的准确度提高。
3、带有菌落的滤膜，可作为检测的永久记录存档。
4、可见的菌落和样品量直接对应，得出定量结果。