抗原和抗体的制备.ppt

免疫学技术有在食品安全检测中的应用第一节抗原的准备抗原制备的主要技术途径天然抗原的制备颗粒抗原的制备绵羊红细胞的制备流程图颗粒抗原的制备细菌细胞抗原的制备流程图
种类：蛋白质多糖和细菌毒素。
细胞内存在的部位：胞外抗原和胞内抗原。
胞外抗原:收集培养液或分泌物。
胞内抗原:提取、分离和纯化。胞内抗原的提取、分离和纯化1、酶处理法2、冻融法3、超声破碎法4、表面活性剂处理法抗原的纯化1、超速离心法2、选择性沉淀法3、凝胶层析法凝胶层析（分子筛）4、离子交换层析法离子交换层析5、亲和层析法正常细胞
＋亲和层析抗原的鉴定半抗原免疫原的制备半抗原载体类型半抗原-载体连接方法1混合半抗原-载体连接方法3半抗原-载体连接方法4佐剂（二）常用佐剂的种类和制备2.明矾佐剂作用大于不完全佐剂
局部形成肉芽种和溃疡
不能用于人体人工抗原及基因工程抗原人工合成抗原基因工程抗原小结第二节抗体的制备多克隆抗体的制备免疫动物的选择免疫方法1.颈动脉放血法
2.心脏采血法
3.静脉采血法免疫血清的分离和保存特异性抗体的纯化特异性IgG抗体的纯化特异性抗体的鉴定亲合力单克隆抗体技术杂交瘤技术的原理及流程HAT培养基是含有次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸苷(T)和甘氨酸的完全培养基。在氨基蝶呤(二氢叶酸类似物)存在下，这种酶缺陷的细胞不能通过核苷酸合成旁路合成次黄嘌呤和胸苷。
制备单克隆抗体的方法是用缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧啶核苷酸酶的瘤细胞变异株与脾脏的B细胞融合。
融合的杂交瘤细胞由于脾淋巴细胞具有次黄嘌呤磷酸核糖转化酶，可以通过次黄嘌呤合成DNA，克服氨基喋呤的阻断，因此杂交瘤细胞大量繁殖而被筛选出来。B淋巴细胞在一般培养基中不能长期生长，一般于二周内均死亡。
PEG：聚乙二醇单克隆抗体的特性基因工程抗体(Geneticengineeringantibody)一.嵌合抗体(chimericantibody)二.单链抗体(singlechainantibody)三.人源化抗体(humanizedantibody)小结作业