外泌体提取方法总结.doc
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外泌体提取方法总结.doc
细胞培养上清:即在4℃下,首先300×g离心10min,吸取上清液,然后2000×g离心10min;吸取上清液后,10000×g高速离心30min,吸取上清液;140000×g超速离心90min;除去上清液,所获得的沉淀即为外泌体。用PBS缓冲液洗涤沉淀并重悬后,140000×g再次离心90min,100μLPBS缓冲液重悬沉淀,冻存于-80℃备用。将小鼠或人血收集在1。5mL管中,并使其在37℃下凝结1小时而不进行抗凝。此后,将其以2,000×g离心持续10分钟获得血清。接着将血清以3,000×g离心1
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一种外泌体提取装置及提取方法.pdf
本发明涉及混合设备领域,具体涉及一种外泌体提取装置及提取方法。搅拌桶通过导管和离心机构相连通,用于将搅拌桶内搅拌完成的物料输送至离心机构内。搅多个支撑框沿转动轴周向均布,且支撑框与转动轴固接。每个支撑框内设有多个支撑杆,支撑杆和转动轴径向方向重合,支撑杆的一端与转动轴固接,多个支撑杆沿转动轴轴向方向均布设置。阻力板用于在受到阻力变大时,带动搅拌叶片向远离转动轴的一侧滑动,搅拌叶片沿支撑杆周向转动。转向机构带动改搅拌叶片相邻的两个搅拌叶片发生转动,使得搅拌叶片对物料的引导方向发生改变,进而使搅拌桶内物料的流
微流控芯片及外泌体提取方法.pdf
本发明涉及一种微流控芯片及外泌体提取方法。该微流控芯片包括旋转中心和至少一个提取机构,提取机构包括进样单元、捕获单元和收集单元,收集单元与捕获单元连接并位于捕获单元的下游,收集单元包括废液池、目标物池和三通微流道,废液池和目标物池通过三通微流道与载体过滤池连通,当洗脱液流入所述三通微流道时,三通微流道的与目标物池连接的支路的压强低于三通微流道的与废液池连接的支路的压强,以使含有目标物的洗脱液流向目标池。采用上述微流控芯片提取目标物时损失量小。
一种外泌体的分离提取方法.pdf
本发明公开了一种外泌体的分离提取方法,该方法是将含外泌体的液体样品用孔径0.45nm的超滤膜进行过滤,所得滤液过多聚赖氨酸修饰的阳离子树脂柱,外泌体被多聚赖氨酸吸附,其他杂蛋白、脂类、盐从柱子穿过,通过洗脱液进行洗脱得到粗提的外泌体溶液;粗提的外泌体溶液再经过CD63‑CNBr‑Sepharose4B等层析柱精提,最后用100KD孔径的超滤膜超滤,获得纯度95%以上的外泌体。本发明方法无需超速离心,即可实现从培养上清和乳品等中提取高纯度外泌体,整个提取过程操作简单,稳定,容易操作,提取的外泌体结构完整、