一种发酵法生产辅酶Q10的提取纯化方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113636924A(43)申请公布日2021.11.12(21)申请号202111073677.4(22)申请日2021.09.14(71)申请人湖北诺克特药业股份有限公司地址432999湖北省孝感市孝昌县城南工业园站前三路东延线(72)发明人石振拓王建中(74)专利代理机构上海精晟知识产权代理有限公司31253代理人刘点(51)Int.Cl.C07C46/10(2006.01)C07C50/28(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种发酵法生产辅酶Q10的提取纯化方法(57)摘要本发明公开了一种发酵法生产辅酶Q10的提取纯化方法，利用甲醇处理正己烷从类球红细菌发酵菌丝体提取的富含辅酶Q10的浓缩提取物，搅拌下50‑65℃加热0.5‑2h，甲醇提取液再经冷却析晶、过滤得到辅酶Q10；本发明通过加热下卟啉类化合物、类脂化合物与甲醇形成了一个新的溶剂体系并在冷却后析出辅酶Q10，达到初步分离及纯化辅酶Q10的目的，并且获得较高的纯度及提取率，同时大幅降低了环保压力，进一步推动了发酵法提取辅酶Q10的工业化发展。CN113636924ACN113636924A权利要求书1/1页1.一种发酵法生产辅酶Q10的提取纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：类球红细菌发酵菌丝体正己烷提取液经回收溶剂得浓缩液；搅拌下向浓缩液中加入甲醇，加热，甲醇提取液经冷却析晶、过滤干燥得到辅酶Q10。2.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，所述甲醇加热条件为50‑65℃，搅拌0.5‑2h。3.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，所述冷却析晶条件为0‑25℃，静置4‑12h。4.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，所述浓缩液经甲醇重复提取2‑3次，合并辅酶Q10。5.根据权利要求4所述的提取纯化方法，其特征在于，所述甲醇总的用量为浓缩前提取液体积的1.75‑2倍。6.根据权利要求4所述的提取纯化方法，其特征在于，所述重复提取过程每次甲醇的用量为浓缩前提取液体积的0.25‑1.5倍。7.根据权利要求5所述的提取纯化方法，其特征在于，所述重复提取步骤中，产物分离后的甲醇提取液重复套用于首次提取。8.根据权利要求1所述的提取纯化方法，其特征在于，所述方法得到辅酶Q10经无水乙醇纯化后得到辅酶Q10纯品。2CN113636924A说明书1/5页一种发酵法生产辅酶Q10的提取纯化方法技术领域[0001]本发明属于生物制药领域，涉及一种发酵法生产辅酶Q10的提取纯化方法。背景技术[0002]辅酶Q10，又名泛醌10，结构式如下：[0003][0004]传统的利用正己烷从类球红细菌的发酵菌丝体提取的富含辅酶Q10浓缩物富含辅酶Q10，以及脂溶性卟啉化合物、脂类化合物(如硬脂酸及棕榈酸)、各种类胡萝卜素、糖脂类化合物等易溶于正己烷的物质，还混杂有蛋白质等。由于富含卟啉类化合物，所以正己烷从类球红细菌发酵菌丝体提取的富含辅酶Q10浓缩液呈紫黑色的焦油状。进一步将辅酶Q10从紫黑色的焦油状物中提取并纯化是发酵方法制备辅酶Q10的关键工艺。[0005]辅酶Q10是种脂溶性的醌类物质，为黄色或淡黄色结晶，在碱性条件下不稳定易降解，对热、酸较稳定。在油脂中有较大的溶解度，易溶于正己烷、石油醚、丙酮、乙酸乙酯。氯仿等低极性有机溶剂中。一般资料都叙述辅酶Q10在乙醇中微溶，在甲醇与水中不溶。[0006]以正己烷为溶剂从类球红细菌发酵菌丝体提取的浓缩物中富含辅酶Q10。要将辅酶Q10从浓缩物中提取出来，目前生产中常用的方法有皂化法、溶剂萃取法、超声提取法、超临界萃取法等。但目前国内外主要采用的是氢氧化钠‑甲醇皂化法。[0007]皂化是强碱与酯类物质反应，酯类发生水解生成羧酸盐和醇，在提取的同时实现提取物的初步纯化。进入提取浓缩物的酯类物质可以通过皂化分解成难溶于提取剂的羧酸盐和醇经水洗而分离除去，同时除去的还有卟啉类物质等各类杂质。为在室温下实现皂化，一定量甲醇的存在是必须的。但在皂化处理的过程中容易出现乳化现象，还需要添加大量的氯化钠抑制乳化。乳化轻则造成辅酶Q10流失，重则使生产难以为继。而且产生的皂化液呈黑色，高碱高盐高甲醇，普通的环保设施及工艺不能处理。[0008]另外，由于辅酶Q10在碱性条件下不稳定易于降解，必须添加抑制剂如焦性没食子酸来抑制降解，但这不仅增加了成本，而且有焦性没食子酸残留的危害性。发明内容[0009]本发明是提供一种发酵法生产辅酶Q10的提取纯化方法，以至少解决现有技术中出现的诸多问题之一。[0010]鉴于此，本发明的方案如下：[0011]一种发酵法生产辅酶Q10的提取纯化方法，包括如下步骤：类球红细菌发酵菌丝体正己烷提取液经回收溶剂