辅酶Q10的提取纯化方法及由其制备的辅酶Q10.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108863743A(43)申请公布日2018.11.23(21)申请号201810796126.2(22)申请日2018.07.19(71)申请人浙江新和成股份有限公司地址312500浙江省绍兴市新昌县大道西路418号申请人黑龙江新和成生物科技有限公司上虞新和成生物化工有限公司(72)发明人闵一陈召峰张锦阳涂仕春胡伟江(74)专利代理机构北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙)11277代理人刘新宇李茂家(51)Int.Cl.C07C46/10(2006.01)C07C50/28(2006.01)权利要求书2页说明书9页附图1页(54)发明名称辅酶Q10的提取纯化方法及由其制备的辅酶Q10(57)摘要本发明涉及辅酶Q10的提取纯化方法及由其制备的辅酶Q10。该方法从辅酶Q10菌体中提取纯化辅酶Q10，包括提取、沉淀、脱色和层析精制步骤，针对性地去除了细菌色素、非极性脂类、中性脂类、极性脂类以及醌类同系物等杂质，操作步骤简单、产品损失少，产品辅酶Q10的纯度可达到99.8％以上，总收率可达到98.5％以上。CN108863743ACN108863743A权利要求书1/2页1.一种辅酶Q10的提取纯化方法，其包括如下步骤：i)对辅酶Q10菌体进行提取，提取体系是非极性有机溶剂、极性有机溶剂和水的组合；ii)将步骤i)得到的提取物与酮类溶剂混合以沉淀去除杂质；iii)将步骤ii)得到的去除杂质后的处理物采用吸附剂吸附或结晶进行脱色；以及iv)将步骤iii)得到的脱色物进行层析精制，得到提取纯化后的辅酶Q10。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤i)的提取体系中非极性有机溶剂、极性有机溶剂和水的体积比为6～10:2～6:1，优选为7～9:2～4:1，所述提取导致分层，将分离得到的油相脱除溶剂后，得到辅酶Q10提取物。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤i)中提取体系与辅酶Q10菌体的体积质量比以mL/g表示为10～20:1，优选为10～18:1，更优选为10～15:1。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述非极性有机溶剂为环己烷、乙醚、异丙醚、异辛烷、正己烷或石油醚中的至少一种，优选为环己烷、正己烷或石油醚，所述极性有机溶剂为丙酮、乙腈、乙酸乙酯、甲醇、乙醇和异丙醇中的至少一种，优选为丙酮、乙腈或乙酸乙酯，所述水为所述细菌中的水分或/和添加的水。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤ii)的酮类溶剂和所述步骤i)得到的提取物的体积质量比以mL/g表示为1～30:1，优选为1～20:1，更优选为5～10:1，所述酮类溶剂为丙酮、丁酮、2-戊基酮和甲基异丁基酮中的至少一种，优选为丙酮或丁酮。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤iii)的吸附剂为活性白土、硅藻土和活性炭中的至少一种，优选为活性白土；所述吸附剂用量为辅酶Q10质量的0.1～100倍，优选为0.1～40倍，更优选为0.3～5倍。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤iii)的结晶脱色采用醇类溶剂和酮类溶剂组成的混合体系，所述混合体系中的醇类溶剂与酮类溶剂的体积比为0.1～9:1，优选为0.5～7:1，更优选为2～6:1，所述醇类溶剂为甲醇、乙醇和异丙醇中的至少一种，优选为乙醇，所述酮类溶剂为丙酮、丁酮、2-戊基酮和甲基异丁基酮中的至少一种，优选为丙酮或丁酮。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的去除杂质后的处理物为过滤步骤ii)中沉淀的杂质得到的含有辅酶Q10的滤液，或将过滤步骤ii)中沉淀的杂质得到的含有辅酶Q10的滤液脱除溶剂后，得到的滤液浓缩物。9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，步骤iii)中所述结晶使用的混合体系与辅酶Q10的体积质量比以mL/g表示为5～35:1，优选为10～30:1，更优选为15～22:1，所述结晶的温度为-10～25℃。10.根据权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤iv)包括：将所述步骤iii)得到的脱色物溶解于非极性溶剂，上样，通过层析柱进行纯化，用非极性有机溶剂和极性有机溶剂组成混合溶剂作为洗脱剂，得到辅酶Q10。11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述非极性有机溶剂为石油醚、乙醚、正己烷或异辛烷中的至少一种，优选为石油醚或正己烷，所述极性有机溶剂为异丙醇、乙醇、1,4-二氧六环、乙酸乙酯和丙酮中的至少一种，优选为异丙醇或乙酸乙酯，所述层析柱中的固定相为硅胶，流动相为非极性有机溶剂和极性有机溶剂的混合溶剂。12.根据权利要求1-11任一项所述的方法制备的辅酶Q10，所述辅酶Q10的纯度达到2CN108863743A权利要求书2/2页99.8％