工程化纳米修饰的中性粒细胞及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113952356A(43)申请公布日2022.01.21(21)申请号202111220802.XA61K47/04(2006.01)(22)申请日2021.10.20A61K47/34(2017.01)A61P35/00(2006.01)(66)本国优先权数据202110036495.32021.01.12CN(71)申请人上海市东方医院（同济大学附属东方医院）地址200120上海市浦东新区即墨路150号(72)发明人乐文俊刘中民吴敏靓胡益辉梅天笑张一帆(74)专利代理机构南京经纬专利商标代理有限公司32200代理人余俊杰(51)Int.Cl.A61K33/00(2006.01)A61K47/02(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图4页(54)发明名称工程化纳米修饰的中性粒细胞及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了工程化纳米修饰的中性粒细胞及其制备方法和应用，所述中性粒细胞由纳米材料修饰，二者通过静电吸附、范德华力、氢键、化学反应或抗原‑抗体亲和反应结合；其中，中性粒细胞自身携带酶活性物质，纳米材料经信号刺激后调控或激活中性粒细胞，从而释放酶活性物质。优点如下：(1)本发明利用中性粒细胞对肿瘤微环境的响应，激活中性粒细胞释放酶活性物质，催化底物，原位产生光热/光敏剂，达到彻底清除肿瘤细胞的目标；(2)通过MRI/CT/超声等成像手段进行体内示踪，实时监测细胞肿瘤部位的蓄积情况，利于选择最佳治疗时间；(3)本发明制备方法简单，易于操作，为进一步激发中性粒细胞的功能提供了新的思路和方法。CN113952356ACN113952356A权利要求书1/1页1.工程化纳米修饰的中性粒细胞，其特征在于，所述中性粒细胞由纳米材料修饰，二者通过静电吸附、范德华力、氢键、化学反应或抗原‑抗体亲和反应结合，二者的结合部位为细胞表面、细胞内、细胞器内中的至少一种；其中，中性粒细胞自身携带酶活性物质，纳米材料经信号刺激后调控或激活中性粒细胞，从而释放酶活性物质。2.根据权利要求1所述的工程化纳米修饰的中性粒细胞，其特征在于，所述纳米材料为无机材料、有机材料或有机物与无机物混合材料。3.根据权利要求2所述的工程化纳米修饰的中性粒细胞，其特征在于，无机纳米材料为FeC磁性纳米粒、HCuSNP纳米粒、Fe3O4@SiO2纳米材料；所述有机材料为脂质体；所述有机物与无机物混合材料为癌细胞膜包被的Fe3O4纳米粒。4.根据权利要求1所述的工程化纳米修饰的中性粒细胞，其特征在于，所述纳米材料的形状为核壳结构、脂质体或中空结构。5.根据权利要求1所述的工程化纳米修饰的中性粒细胞，其特征在于，所述酶活性物质为MPO、HRP或CAT。6.根据权利要求1所述的工程化纳米修饰的中性粒细胞，其特征在于，所述信号刺激为外源性刺激或内源性刺激，其中外源性刺激为激光或超声，内源性刺激为酸性环境、高谷胱甘肽表达或高H2O2表达。7.根据权利要求6所述的工程化纳米修饰的中性粒细胞，其特征在于，酸性环境为pH<5.5，高谷胱甘肽表达为谷胱甘肽表达量>5mmol/L，高H2O2表达为H2O2表达量达到0.5nmol/104cell/h。8.权利要求1‑7任一所述工程化纳米修饰的中性粒细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、制备具有MRI、CT或超声成像、肿瘤靶向、光热转换、光声转换或磁热功能的纳米材料；S2、分离中性粒细胞，将纳米材料装载在中性粒细胞表面或内部；S3、对S2制备的产物进行分离纯化获得工程化纳米修饰的中性粒细胞。9.权利要求1‑7任一所述工程化纳米修饰的中性粒细胞在制备肿瘤治疗药物中的应用。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述工程化纳米修饰的中性粒细胞作为肿瘤治疗药物的应用方式为静脉注射。2CN113952356A说明书1/5页工程化纳米修饰的中性粒细胞及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于生物医药和纳米材料技术领域，涉及一种通过纳米材料修饰中性粒细胞的方法，从而调控或激活修饰后的中性粒细胞靶向并响应肿瘤微环境，具体为工程化纳米修饰的中性粒细胞及其制备方法和应用。背景技术[0002]临床上对实体肿瘤的治疗首选治疗方案为根治性切除，但是由于可能存在肉眼不可见的转移灶，肿瘤复发可能性极大。尽管化疗等治疗手段逐渐被应用于临床，但传统化疗药物的细胞选择性较差，在杀伤肿瘤细胞的同时，正常的组织细胞也会受到损伤，从而引起脱发、恶心呕吐、骨髓抑制等不良反应。因此，肿瘤靶向治疗得到极大关注，靶向治疗的目标在于将药物准确的递送到肿瘤部位并且尽可能降低不良反应发生率。[0003]中性粒细胞是外周血循环和免疫系统中含量最大的白细胞，占白细胞总量的70％，在防御感染以及激活