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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114058689A(43)申请公布日2022.02.18(21)申请号202010754298.0(22)申请日2020.07.30(71)申请人南京市妇幼保健院地址210004江苏省南京市莫愁路天妃巷123号申请人天昊生物医药科技(苏州)有限公司(72)发明人许争峰胡平谭建新姜正文余锋(74)专利代理机构上海一平知识产权代理有限公司31266代理人肖艳徐迅(51)Int.Cl.C12Q1/6883(2018.01)C12Q1/6858(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书6页说明书34页序列表52页附图7页(54)发明名称一种基因突变检测试剂盒及其应用(57)摘要本发明提供了一种ATP7B、PAH、PTS、MUT、MMACHC基因突变检测试剂盒及其应用。具体地,本发明利用SNaPshot技术对ATP7B、PAH、PTS、MUT、MMACHC基因的224个热点突变进行检测。设计了51对PCR引物用于扩增了包含224个位点的51个100‑500bp片段,也设计了224个紧邻目标位点的延伸引物用于单碱基延伸。本发明的试剂盒具有非常的高的准确性,能够快速进行相关疾病的基因诊断,为临床医生提供有效参考。CN114058689ACN114058689A权利要求书1/6页1.一种基因突变检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含特异性检测ATP7B基因的突变位点的核酸检测试剂;并且,所述ATP7B基因的突变位点选自下组A:组A2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述ATP7B基因的突变位点选自下组B:2CN114058689A权利要求书2/6页组B3.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包含特异性检测MMACHC基因的突变位点的核酸检测试剂,并且,所述MMACHC基因的突变位点选自下组C:3CN114058689A权利要求书3/6页组C4.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包含特异性检测MUT基因的突变位点的核酸检测试剂,并且,所述MUT基因的突变位点选自下组D:组D4CN114058689A权利要求书4/6页5.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包含特异性检测PAH基因和PTS基因的突变位点的核酸检测试剂,并且,所述PAH基因和PTS基因的突变位点选自下组E:组E5CN114058689A权利要求书5/6页6.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含针对所述突变位点的特异性多重PCR引物,较佳地,所述多重PCR引物的序列如SEQIDNO:1-103所示。7.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包含选自下组的针对所述突变位点的单碱基延伸引物:针对组A的突变位点的单碱基延伸引物,并且所述单碱基延伸引物的序列如SEQIDNO:104-136所示,针对组B的突变位点的单碱基延伸引物,并且所述单碱基延伸引物的序列如SEQIDNO:137-171所示,针对组C的突变位点的单碱基延伸引物,并且所述单碱基延伸引物的序列如SEQIDNO:172-190所示,针对组D的突变位点的单碱基延伸引物,并且所述单碱基延伸引物的序列如SEQIDNO:191-215所示,针对组E的突变位点的单碱基延伸引物,并且所述单碱基延伸引物的序列如SEQIDNO:216-251所示,针对组F的突变位点的单碱基延伸引物,并且所述单碱基延伸引物的序列如SEQIDNO:252-288所示,和针对组G的突变位点的单碱基延伸引物,并且所述单碱基延伸引物的序列如SEQIDNO:289-321所示。8.一种核酸检测试剂的用途,用于制备基因突变检测试剂盒,其中,所述的核酸检测试6CN114058689A权利要求书6/6页剂包括特异性检测ATP7B基因的突变位点核酸检测试剂;并且,所述ATP7B基因的突变位点选自组A。9.如权利要求8所述的用途,其特征在于,所述基因突变检测试剂盒用于检测ATP7B、PAH、PTS、MUT和/或MMACHC基因的突变。10.如权利要求8所述的用途,其特征在于,所述基因突变检测试剂盒用于选自下组的疾病的基因诊断:肝豆状核变性、苯丙酮尿症、四氢生物蝶呤缺乏症、甲基丙二酸血症、或其组合。7CN114058689A说明书1/34页一种基因突变检测试剂盒及其应用技术领域[0001]本发明涉及遗传学领域,更具体地涉及一种基因突变检测试剂盒及其应用。背景技术[0002]遗传代谢疾病是基因突变导致维持机体正常代谢所必需的某些酶、受体或载体缺乏或蛋白质异常发生的疾病,导致出现相应的病理改变和临床表现。尽管单一遗传代谢病的发病率低,但总体发病却能达到活产婴儿的1/500。目前,遗传代谢病的基因诊断主要基于二代