鸭圆环、鸭腺病毒和鸭坦布苏病毒的三重PCR检测试剂盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114107556A(43)申请公布日2022.03.01(21)申请号202111141476.3(22)申请日2021.09.28(71)申请人聊城大学地址252000山东省聊城市东昌府区湖南路1号(72)发明人刘成司振书李玉保郭尚敬朱明霞裴兰英路建彪(74)专利代理机构北京开阳星知识产权代理有限公司11710代理人吕亚会(51)Int.Cl.C12Q1/70(2006.01)C12Q1/686(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书1页说明书7页序列表2页附图3页(54)发明名称鸭圆环、鸭腺病毒和鸭坦布苏病毒的三重PCR检测试剂盒(57)摘要本公开涉及鸭圆环病毒、鸭腺病毒和鸭坦布苏病毒的三重PCR检测引物组，所述三重PCR检测引物组包括第一引物对、第二引物对和第三引物对：所述第一引物对具有SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示核苷酸序列对；所述第二引物对具有SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示核苷酸序列对；所述第三引物对具有SEQIDNO.5和SEQIDNO.6所示核苷酸序列对。本公开还提供了鸭圆环病毒、鸭腺病毒和鸭坦布苏病毒的三重PCR检测试剂盒，本公开的检测试剂盒可以同时检测鸭圆环、鸭腺病毒和鸭坦布苏病毒的混合感染或者单一感染情况，减轻工作量且极大程度缩短检测时间，达到快速检测病原的目的。CN114107556ACN114107556A权利要求书1/1页1.鸭圆环病毒、鸭腺病毒和鸭坦布苏病毒的三重PCR检测引物组，其特征在于，所述三重PCR检测引物组包括第一引物对、第二引物对和第三引物对：所述第一引物对具有SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示核苷酸序列对；所述第二引物对具有SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示核苷酸序列对；所述第三引物对具有SEQIDNO.5和SEQIDNO.6所示核苷酸序列对。2.根据权利要求1所述的三重PCR检测引物组，其特征在于，所述第一引物对、第二引物对和第三引物对的摩尔比为1:(0.5‑2):(0.5‑4)。3.根据权利要求2所述的三重PCR检测引物组，其特征在于，所述第一引物对、第二引物对和第三引物对的摩尔比为1:1:2。4.鸭圆环病毒、鸭腺病毒和鸭坦布苏病毒的三重PCR检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1‑3中的任一项所述的三重PCR检测引物组。5.根据权利要求4所述的三重PCR检测试剂盒，其特征在于，所述三重PCR检测试剂盒还包括2×TaqMasterMix(DyePlus)。6.权利要求4或5所述的三重PCR检测试剂盒在三重PCR扩增方面的应用。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述三重PCR扩增的退火温度为52‑59℃，优选57.4℃。8.非诊断和治疗目的的同时检测鸭圆环病毒、鸭腺病毒和鸭坦布苏病毒的三重PCR检测方法，其特征在于，所述三重PCR检测方法包括利用权利要求1‑3中的任一项所述的三重PCR检测引物组或权利要求4或5所述的三重PCR检测试剂盒。9.根据权利要求8所述的三重PCR检测方法，其特征在于，所述三重PCR检测方法包括如下步骤：(1)提取待测样品的RNA/DNA，反转录得到cDNA/DNA；(2)以待测样品的cDNA/DNA作为模板进行PCR反应，其中，反应体系中包括权利要求1‑3中的任一项所述的三重PCR检测引物组；(3)对步骤(2)得到的PCR产物进行琼脂凝胶电泳检测，通过检测结果判断待测样品是否有鸭圆环病毒、鸭腺病毒或鸭坦布苏病毒。2CN114107556A说明书1/7页鸭圆环、鸭腺病毒和鸭坦布苏病毒的三重PCR检测试剂盒技术领域[0001]本公开涉及分子生物学技术领域，尤其涉及鸭圆环、鸭腺病毒和鸭坦布苏病毒的三重PCR检测试剂盒，特别涉及一种鸭圆环、鸭腺病毒和鸭坦布苏病毒的三重PCR检测引物组及由其得到的检测试剂盒。背景技术[0002]鸭圆环病毒(duckcircovirus，DuCV)是当前引起鸭慢性消耗性和免疫抑制性传染病的重要原因，该病毒对于不同品种及生长阶段的鸭均可感染。近年来，DuCV在鸭群中的感染及其混合感染病例呈明显上升趋势。单纯感染DuCV可导致感染鸭羽毛杂乱、生长发育迟缓、体重减轻，因发病症状不明显，易被忽视。但DuCV感染主要侵害宿主的免疫系统，造成免疫抑制，导致免疫失败以及细菌和病毒的继发感染和混合感染，使疫病防治的难度增加，鸭死亡率升高，给养鸭业造成严重的经济损失。[0003]鸭腺病毒(duckadenovirus,DAdV)主要包括鸭腺病毒1型(duckadenovirus1,DAdV‑1)、鸭腺病毒2型(duckadenovirus2,DAdV‑2)、鸭腺病毒3型(duckadenovirus3,D