调控玉米叶片衰老的主效QTL及其分子标记和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114292942A(43)申请公布日2022.04.08(21)申请号202111572928.3(22)申请日2020.10.19(62)分案原申请数据202011115291.02020.10.19(71)申请人中国科学院植物研究所地址100093北京市海淀区香山南辛村20号中国科学院植物研究所(72)发明人景海春郝怀庆冯雪(74)专利代理机构北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙)11333代理人胡敬红(51)Int.Cl.C12Q1/6895(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书2页说明书7页序列表2页附图2页(54)发明名称调控玉米叶片衰老的主效QTL及其分子标记和应用(57)摘要本发明涉及调控玉米叶片衰老的主效QTL及其分子标记和应用，属于分子遗传育种领域。所述的主效位点Stg3和Stg7具有调控玉米叶片衰老的功能，分别位于玉米的第3号和第7号染色体上，与它们连锁的分子标记分别为M36、A‑3‑11和A‑7‑6、A‑7‑7。本发明所述分子标记在筛选和鉴定具有叶片衰老延缓特性的玉米资源以及精细定位QTL中的目标基因中具有重要的应用价值，为分子遗传育种中延长作物叶片光合作用功能期提供了重要的候选位点。CN114292942ACN114292942A权利要求书1/2页1.扩增与玉米叶片衰老主效位点Stg7连锁的分子标记的引物对，其中：A‑7‑6的正向引物序列为SEQIDNO.7，反向引物序列为SEQIDNO.8；或者A‑7‑7的正向引物序列为SEQIDNO.9，反向引物序列为SEQIDNO.10。2.与玉米叶片衰老主效位点Stg7连锁的分子标记，其特征在于，所述主效位点Stg7位于玉米第7号染色体上，并且与所述主效位点Stg7连锁的分子标记为A‑7‑6或A‑7‑7；各分子标记扩增的特异性引物序列如下：A‑7‑6的正向引物序列为SEQIDNO.7，反向引物序列为SEQIDNO.8；A‑7‑7的正向引物序列为SEQIDNO.9，反向引物序列为SEQIDNO.10。3.根据权利要求2所述的分子标记，其特征在于：A‑7‑6的正向引物序列为SEQIDNO.7，反向引物序列为SEQIDNO.8，在持绿株系中分子标记扩增产物为145bp的DNA片段；A‑7‑7的正向引物序列为SEQIDNO.9，反向引物序列为SEQIDNO.10，在持绿株系中分子标记扩增产物为144bp的DNA片段。4.根据权利要求3所述的分子标记，所述持绿株系为Si‑144以及持绿株系Si‑144与衰老株系Si‑287构建的近等基因系NIL‑Stg3Si‑144、NIL‑Stg7Si‑144和NIL‑Stg3Si‑144/Stg7Si‑144，所述与玉米叶片衰老主效位点Stg7连锁的分子标记，所述Stg3是玉米叶片衰老的主效位点，位于玉米第3号染色体上。5.权利要求2‑4任一所述的分子标记在定位玉米叶片衰老主效位点Stg7中的应用。6.权利要求2‑4任一所述的分子标记在鉴定玉米叶片衰老性状中的应用。7.权利要求2‑4任一所述的分子标记在筛选和鉴定玉米叶片衰老延缓株系中的应用。8.根据权利要求5‑7任一所述的应用，提取玉米基因组DNA，采用下述引物对进行扩增，A‑7‑6的正向引物序列为SEQIDNO.7，反向引物序列为SEQIDNO.8；或者A‑7‑7的正向引物序列为SEQIDNO.9，反向引物序列为SEQIDNO.10；A‑7‑6的正向引物序列为SEQIDNO.7，反向引物序列为SEQIDNO.8，在持绿株系中分子标记扩增产物为145bp的DNA片段；表明该玉米叶片衰老主效位点Stg7Si‑144等位基因的存在，该株系具有玉米叶片衰老延缓性状，该株系为玉米叶片衰老延缓株系；A‑7‑7的正向引物序列为SEQIDNO.9，反向引物序列为SEQIDNO.10，在持绿株系中分子标记扩增产物为144bp的DNA片段；表明该玉米叶片衰老主效位点Stg7Si‑144等位基因的存在，该株系具有玉米叶片衰老延缓性状，该株系为玉米叶片衰老延缓株系。9.根据权利要求6‑7任一所述的应用，提取玉米基因组DNA，采用下述引物对进行扩增，所述引物对为M36的正向引物1序列为SEQIDNO.1，正向引物2序列为SEQIDNO.2，反向引物序列为SEQIDNO.3；和A‑3‑11的正向引物1序列为SEQIDNO.4，正向引物2序列为SEQIDNO.5，反向引物序列为SEQIDNO.6；和A‑7‑6的正向引物序列为SEQIDNO.7，反向引物序列为SEQIDNO.8；和A‑7‑7的正向引物序列为SEQIDNO.9，反向引物序列为SEQIDNO.10；其中：M36的正向引物1的序列为SEQIDN