α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三联检测卡及其检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103675219103675219A(43)申请公布日2014.03.26(21)申请号201310680080.5(22)申请日2013.12.13(71)申请人长沙安迪生物科技有限公司地址410205湖南省长沙市高新开发区麓谷麓景路8号(72)发明人周坚王黎丽唐爱明丑亚琴刘增再(74)专利代理机构长沙市融智专利事务所43114代理人潘传军(51)Int.Cl.G01N33/04(2006.01)G01N33/68(2006.01)权权利要求书2页利要求书2页说明书4页说明书4页附图1页附图1页(54)发明名称α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三联检测卡及其检测方法(57)摘要本发明公开了一种α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三联检测卡及其检测方法，属于乳产品检测技术领域。本发明三联检测卡外壳内有测试条，由支承背板上依次粘贴样品垫、数段胶体金膜、硝酸纤维素膜和吸水膜所组成，硝酸纤维素膜上有3条检测带，分别含α-乳白蛋白蛋白质偶联物、β-乳球蛋白蛋白质偶联物、β-酪蛋白蛋白质偶联物，另有1条含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带。本发明优点是能同时检测出牛奶中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白是否达标。检测卡易于制备且节省检测费用，使用方便快速，结果准确。CN103675219ACN10367529ACN103675219A权利要求书1/2页1.一种α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三联检测卡，其特征在于：在长条扁平薄壳状的检测卡外壳（1）中设置测试条（2），检测卡外壳表面有检测窗孔（3）和加样孔（4），测试条（2）是由支承背板（5）上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫（8）、胶体金膜（7）、（14）、（15）、硝酸纤维素膜（6）和吸水膜（9）所组成；支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜（6），支承背板一端叠置粘贴吸水膜（9），另一端叠置粘贴样品垫（8），吸水膜（9）内端与样品垫（8）内端各自分别与硝酸纤维素膜（6）搭接，在样品垫（8）与硝酸纤维素膜（6）的搭接部，两者之间夹置粘贴数段胶体金膜（7）、（14）、（15）；胶体金膜（7）、（14）、（15）依次是含抗α-乳白蛋白抗体、抗β-乳球蛋白抗体和抗β-酪蛋白抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有三条检测带和一条质控带，依次是：含α-乳白蛋白偶联物检测带（10），含β-乳球蛋白偶联物检测带（11），含β-酪蛋白偶联物检测带（12），含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带（13）；测试条2置入检测卡外壳1内，样品垫8正对加样孔4，硝酸纤维素膜6正对检测窗孔3。2.用权利要求1所述的α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三联检测卡的检测方法，其特征是应用免疫学的方法直接检测样品中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白的含量，检测样品为乳制品，处理方法如下：A、针对液态奶样品的处理方法是：液态奶用样品稀释液进行10倍稀释后用于检测；B、针对奶粉样品的处理方法是：称取1g奶粉样品，加入9mL样品稀释液，在试管中搅拌均匀，再用样品稀释液进行10倍稀释后用于检测；C、针对奶制品样品的处理方法是，取1g捣碎后的奶制品样品，加入9mL样品稀释液，在试管中搅拌均匀，再用样品稀释液进行10倍稀释后用于检测；上述三种不同乳制品所采用的处理方法中所使用的样品稀释液为pH7.6、10mmolPBST溶液；将上述处理后的待检测样品液从加样孔（4）中加4滴注入α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三联检测卡的样品垫（8），由于虹吸作用原理，带动待检测的样品液及胶体金膜所含的抗α-乳白蛋白、抗β-乳球蛋白和抗β-酪蛋白单克隆抗体或多克隆抗体胶体金标记物一起向硝酸纤维素膜（6）扩散，5-10分钟内观察结果：如果检测带（10）、（11）、（12）和质控带（13）同时显现棕红色印迹带，表示检测结果为阴性，说明被检测样品中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白含量低于正常值；如果检测带（10）、（11）、（12）不显示颜色，只有质控带（13）显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白含量正常；如果检测带（10）、（11）不显示颜色，检测带（12）和质控带（13）同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白含量正常，而β-酪蛋白含量低于正常值；如果检测带（10）、（12）不显示颜色，检测带（11）和质控带（13）同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中α-乳白蛋白、β-酪蛋白含量含量正常，而β-乳球蛋白含量低于正常值；如果检测带（11）、（12）不显示颜色，检测带（10）和质控带（13）同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检