检测牛乳中A1β‑酪蛋白及A2β‑酪蛋白的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106198692A(43)申请公布日2016.12.07(21)申请号201610784180.6(22)申请日2016.08.31(71)申请人内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司地址011500内蒙古自治区呼和浩特市和林格尔盛乐经济园区(72)发明人刘宇陈伟陈云(74)专利代理机构北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙)11201代理人李志东(51)Int.Cl.G01N27/447(2006.01)权利要求书2页说明书9页附图8页(54)发明名称检测牛乳中A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白的方法(57)摘要本发明提出了一种检测牛乳中A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白的方法。所述方法包括：(1)将待测样品依次进行加热、离心、冷冻及解冻，以便得到待测储备液；(2)将所述待测储备液进行预处理，以便得到待测液，其中，所述预处理包括将所述待测储备液与预处理液进行混合；以及(3)利用毛细管电泳法对所述待测液进行检测，以便确定牛乳中是否含有A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白。利用本发明的方法能够准确地检测出牛乳中是否含有A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白，且操作简便、快速。CN106198692ACN106198692A权利要求书1/2页1.一种检测牛乳中A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白的方法，其特征在于，包括：(1)将所述牛乳依次进行加热、离心、冷冻及解冻，以便得到待测储备液；(2)将所述待测储备液进行预处理，以便得到待测液，其中，所述预处理包括将所述待测储备液与预处理液进行混合；以及(3)利用毛细管电泳法对所述待测液进行检测，以便确定所述牛乳中是否含有A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白。2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述加热是将所述牛乳加热至40～70℃。3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述离心是在1500～10000r/min下进行5～40分钟。4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述冷冻是在-30～-40℃下进行5～60分钟。5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述预处理液含有：30mmol/L的磷酸二氢钠；0.1质量％的羟丙基甲基纤维素；7mol/L的尿素；以及0.05质量％二硫苏糖醇，利用0.1mol/L的NaOH溶液调节所述预处理液的pH值至8.0。6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，利用未涂层毛细管对所述待测液进行所述检测。7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，步骤(3)包括：将所述未涂层毛细管进行活化处理，并利用动态涂层试剂将活化后的未涂层毛细管进行涂层处理，得到具有动态涂层的毛细管；以及利用所述具有动态涂层的毛细管进行检测。8.根据权利要求7所述方法，其特征在于，所述动态涂层试剂含有：200mmol/L的三羟甲基氨基甲烷；60mmol/L的戊二胺；120mmol/L的十六烷基溴化铵；以及80mmol/L的聚乙二醇，利用0.1mol/L的HCl溶液调节所述动态涂层试剂的pH值至3.0。9.根据权利要求7所述方法，其特征在于，所述活化处理包括：用色谱级甲醇冲洗所述未涂层毛细管内壁5～20分钟，再用去离子水冲洗5～20分钟，接着用1～4mol/LNaOH溶液冲洗5～20分钟，静置5～30分钟，最后用去离子水冲洗5～20分钟，所述涂层处理包括：用0.1～0.5mol/L的NaOH溶液冲洗所述活化后的未涂层毛细管内壁3～5分钟，再用去离子水冲洗3～5分钟，接着用所述动态涂层试剂冲洗3～10分钟，静置5～10分钟，最后用缓冲溶液冲洗3～5分钟。10.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述检测条件包括：检测波长为200～450nm；2CN106198692A权利要求书2/2页检测温度为0～40℃，优选25℃；进样方式为压力进样或真空进样，优选压力进样，压力为0～1psi，更优选0.5psi；进样时间为1～20s；工作电压为5～30kv，优选20～30kv；检测频率为4～18Hz；毛细管长度为30～100cm，优选60cm；毛细管内径为25～75μm。3CN106198692A说明书1/9页检测牛乳中A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白的方法技术领域[0001]本发明涉及食品领域。具体地，本发明涉及检测牛乳中A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白的方法。背景技术[0002]牛奶中蛋白质主要有乳清蛋白和酪蛋白两大类，酪蛋白又分为β-酪蛋白、α-酪蛋白，κ-酪蛋白三种，其中β-酪蛋白约占蛋白总量的30％，β-酪蛋白有两种主要的变异型，即A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白。既含有A1β-酪蛋白又含有A2β-酪蛋白的牛乳为A1/A2型牛奶，只含有A2β-酪蛋白的牛奶为A2型牛奶，只含有A1β-酪蛋白的牛奶为A1型牛奶。[0003]母乳中的β-酪蛋白与A2β-酪蛋白在结