一种提升破伤风梭状芽孢杆菌产毒能力的培养基.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105483055A(43)申请公布日2016.04.13(21)申请号201610003498.6(22)申请日2016.01.06(66)本国优先权数据201511017085.52015.12.29CN(71)申请人玉溪沃森生物技术有限公司地址653100云南省玉溪市高新区东风南路83号(72)发明人黄镇李子财施競林建祥(74)专利代理机构昆明合众智信知识产权事务所53113代理人康珉(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)C12R1/145(2006.01)权利要求书1页说明书7页(54)发明名称一种提升破伤风梭状芽孢杆菌产毒能力的培养基(57)摘要本发明公开一种提升破伤风梭状芽孢杆菌产毒能力的培养基。该培养基由牛肉胃酶消化液总氮1.00g/L±0.05g/L，乳酪消化液总氮1.00g/L±0.05g/L，醋酸钠5.0g/L±0.1g/L，磷酸氢二钠1.00g/L±0.05g/L，磷酸二氢钾1.00g/L±0.05g/L，甘油60ml/L±2ml/L，葡萄糖2.5g/L±0.1g/L，Ⅰ号因子5.0ml/L±0.1ml/L，Ⅱ号因子2.00ml/L±0.05ml/L，酵母浸粉5.0g/L±0.1g/L，FeCl3·6H2O0.025g/L±0.001g/L组成。其产毒能力提高了38～48Lf/ml，蛋白收率提高36％。CN105483055ACN105483055A权利要求书1/1页1.一种提升破伤风梭状芽孢杆菌产毒能力的培养基，其特征在于：由以下组分及其含量组成：牛肉胃酶消化液总氮1.00g/L±0.05g/L，乳酪消化液总氮1.00g/L±0.05g/L，醋酸钠5.0g/L±0.1g/L，磷酸氢二钠1.00g/L±0.05g/L，磷酸二氢钾1.00g/L±0.05g/L，甘油60ml/L±2ml/L，葡萄糖2.5g/L±0.1g/L，Ⅰ号因子5.0ml/L±0.1ml/L，Ⅱ号因子2.00ml/L±0.05ml/L，酵母浸粉5.0g/L±0.1g/L，FeCl3·6H2O0.025g/L±0.001g/L；所述的Ⅰ号因子由以下组分及其含量组成：维生素B10.3g/L±0.01g/L，维生素B20.3g/L±0.01g/L，维生素B60.3g/L±0.01g/L，泛酸钙1.2g/L±0.06g/L，生物素0.004g/L±0.001g/L，无水乙醇250ml/L±10ml/L；所述的Ⅱ号因子由以下组分及其含量组成：烟酸2.5g/L±0.1g/L，尿嘧啶2.5g/L±0.1g/L，L-胱氨酸75g/L±1g/L，ZnSO410.0g/L±0.5g/L，MgSO438.4g/L±0.5g/L，浓盐酸150ml/L±10ml/L。2.根据权利要求1所述一种提升破伤风梭状芽孢杆菌产毒能力的培养基，其特征在于：牛肉胃酶消化液总氮0.95g/L，乳酪消化液总氮0.95g/L，醋酸钠4.9g/L，磷酸氢二钠0.95g/L，磷酸二氢钾0.95g/L，甘油58ml/L，葡萄糖2.4g/L，Ⅰ号因子4.9ml/L，Ⅱ号因子1.95ml/L，酵母浸粉4.9g/L，FeCl3·6H2O0.024g/L；所述的Ⅰ号因子由以下组分及其含量组成：维生素B10.29g/L，维生素B20.29g/L，维生素B60.29g/L，泛酸钙1.14g/L，生物素0.003g/L，无水乙醇240ml/L；所述的Ⅱ号因子由以下组分及其含量组成：烟酸2.4g/L，尿嘧啶2.4g/L，L-胱氨酸74g/L，ZnSO49.5g/L，MgSO437.9g/L，浓盐酸140ml/L。2CN105483055A说明书1/7页一种提升破伤风梭状芽孢杆菌产毒能力的培养基技术领域[0001]本发明属于生物技术领域，具体涉及一种提升破伤风梭状芽孢杆菌产毒能力的培养基。背景技术[0002]破伤风梭状芽孢杆菌(Clostridiumtetani)产毒培养基是破伤风类毒素制备过程中的关键因素之一，所以，培养基的质量直接影响破伤风类毒素疫苗的质量和产量。[0003]《微生物培养基的制造与应用》陈天寿主编，1995年第一版中所阐述铁(Fe)是过氧化氢酶、过氧化物酶、细胞色素、细胞色素氧化酶的组成部分，缺铁时这些酶的合成会受到影响，营养菌(破伤风梭状芽孢杆菌)的生长也需要铁最适合的浓度为0.5-0.6mg/L。铁对细菌毒素也很重要，只在一定浓度范围内才能产毒。例如白喉菌在含铁0.14mg/L的培养基中，毒素量最高，铁的浓度达到0.6mg/L时，则完全不产毒。[0004]同时《微生物培养基的制造与应用》陈天寿主编，1995年第一版中还阐述酵母透析液(YeastDialyyzate)成分：酵母粉可配制流脑