一种酪丁酸梭菌及其培养方法与应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105779351A(43)申请公布日2016.07.20(21)申请号201610226482.1(22)申请日2016.04.13(83)生物保藏信息CCTCCNO：M20160902016.03.07(71)申请人南京工业大学地址211816江苏省南京市浦口区浦珠南路30号(72)发明人江凌吴茜黄和刘婷婷唐苏苏(74)专利代理机构江苏致邦律师事务所32230代理人徐蓓(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)A23K10/18(2016.01)权利要求书1页说明书6页C12R1/145(2006.01)序列表1页(54)发明名称一种酪丁酸梭菌及其培养方法与应用(57)摘要本发明公开了一种酪丁酸梭菌及其培养方法与应用。所述酪丁酸梭菌从牛瘤胃中分离得到，其分类命名为酪丁酸梭菌（Clostridiumtyrobutyricum）W428，其保藏编号为CCTCCNO：M2016090。本发明所提供的瘤胃酪丁酸梭菌（Clostridiumtyrobutyricum）W428的培养效率高，该菌能够合成益生因子丁酸，产生果胶酶、纤维素酶、葡聚糖酶等物质，提高饲料利用率。CN105779351ACN105779351A权利要求书1/1页1.一种酪丁酸梭菌，其分类命名为酪丁酸梭菌（Clostridiumtyrobutyricum）W428，其保藏编号为CCTCCNO：M2016090。2.权利要求1所述的酪丁酸梭菌（Clostridiumtyrobutyricum）W428的培养方法，是将酪丁酸梭菌（Clostridiumtyrobutyricum）W428接种于RCM培养基于35℃~37℃、pH6~8.5的条件下进行厌氧培养；所述RCM培养基，在1,000mL中含有：胰蛋白胨，10g；牛肉膏，10g；葡萄糖，5g；氯化钠，5g；酵母膏，3g；乙酸钠，3g；可溶性淀粉，1g；L-半胱氨酸盐酸盐，0.5g；余量为水。3.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于：所述RCM培养基中还含有0.5mg/L刃天青。4.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于：培养温度为37℃。5.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于：培养pH为7.0。6.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于：厌氧环境是通过85%N2、10%H2和5%CO2的混合气得到的。7.权利要求1所述酪丁酸梭菌（Clostridiumtyrobutyricum）W428在饲料添加剂领域的应用，调节畜禽肠道微生态平衡，提高畜禽的生产性能和抗病能力。2CN105779351A说明书1/6页一种酪丁酸梭菌及其培养方法与应用技术领域[0001]本发明涉及微生物领域中的一种酪丁酸梭菌及其培养方法与应用。背景技术[0002]近年来，抗生素的滥用，导致的各种危害已成为一个世界性难题。世界卫生组织宣称：人类将面临无有效抗生素可用的“后抗生素时代”。在饲料中添加抗生素已经成为中国人养殖的习惯，然而长期使用抗生素又会对畜禽造成严重的危害：第一，动物体内产生耐药性细菌，抑制细胞免疫和体液免疫，严重损害动物机体免疫细胞功能，降低动物免疫力和抗病力，甚至造成免疫失败；第二，饲料、添加剂、兽药中超量使用抗生素，会通过食物链进入人体，使人们间接接触抗生素，导致人体患病时用抗生素治疗的效果消失，同时抗生素破坏肠道微生物，影响动物对营养物质的消化能力和动物的生长性能；第三，某些抗生素本身存在毒害作用，如链霉素、卡那霉素、庆大霉素、多粘菌素等。鉴于滥用抗生素潜在的弊端和危机，使致病菌产生耐药性，造成动物肠道菌群失调，免疫力下降，许多国家和地区都禁止或限制在饲料中的添加。酪丁酸梭菌可以利用葡萄糖、木糖、纤维二糖、阿拉伯糖等多种底物，发酵生产丁酸、维生素、氨基酸等益生因子；其中，丁酸是肠道上皮组织细胞的再生和修复主要营养物质。将酪丁酸梭菌添加到动物饲料具有替代抗生素预防和治疗相关动物疾病的潜力，抑制内源性疾病的发生，且增强机体免疫和血液中白细胞（CD4+）的数量，以及改善动物的生产性能和产品质量，减少抗生物用量，提高经济效率。[0003]瘤胃作为反刍动物的消化器官，是迄今已知的、降解转化纤维素类物质效率最高的天然体系，它依赖于瘤胃微生物群体的协同作用将天然纤维类物质快速降解转化成一系列动物营养和能源物质。可以认为瘤胃是一个完美的、天然的秸秆纤维降解消化加工厂和高效厌氧发酵罐。[0004]目前报道的能产丁酸的菌有：丁酸梭菌（Clostridiumbutyricum）、酪丁酸梭菌（Clostridiumtyrobutyricum）、柔嫩梭菌（Clostridiumleptum）、球形梭菌（Clostridiumcoccoides）、人罗