胶乳增强免疫比浊法检测心型脂肪酸结合蛋白的试剂盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105911297A(43)申请公布日2016.08.31(21)申请号201610531911.6(22)申请日2016.07.07(71)申请人宏葵生物（中国）有限公司地址271199山东省莱芜市吕花园工业园(72)发明人王保全尚凯王霞(74)专利代理机构济南泉城专利商标事务所37218代理人刘丽(51)Int.Cl.G01N33/68(2006.01)权利要求书1页说明书13页(54)发明名称胶乳增强免疫比浊法检测心型脂肪酸结合蛋白的试剂盒(57)摘要本发明涉及医学检测技术领域，特别涉及一种心型脂肪酸结合蛋白检测试剂盒，含有试剂R1和试剂R2，其中试剂R1中含有Tris缓冲液，聚乙二醇对异辛基苯基醚，pH为7.0-8.0，试剂R2中含有鼠抗人心型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体乳胶粒子，Tris缓冲液，牛血清白蛋白；烷基糖苷APG0810，甘露醇，聚乙二醇对异辛基苯基醚，pH值为7.0-8.0。本申请的试剂盒中严格限定了不同粒径的乳胶颗粒所占的比例，提高了检测的灵敏度和特异性；得到适合于此体系的表面活性剂和稳定剂的组合，从而在测定快速灵敏、特异性高的前提下，整个体系稳定性好，操作简便，可适于临床全自动或半自动生化分析仪配套使用。CN105911297ACN105911297A权利要求书1/1页1.一种胶乳增强免疫比浊法检测心型脂肪酸结合蛋白的试剂盒，其特征在于含有试剂R1和试剂R2，其中试剂R1中含有以下组分：Tris缓冲液120mmol/L，聚乙二醇对异辛基苯基醚20mmol/L，pH为7.0-8.0，试剂R2中含有以下组分：鼠抗人心型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体乳胶粒子4.5g/L，Tris缓冲液120mmol/L，牛血清白蛋白3mmol/L；烷基糖苷APG08101.5g/L，甘露醇0.5g/L，聚乙二醇对异辛基苯基醚10mmol/L，pH值为7.0-8.0，所述鼠抗人心型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体乳胶粒子中乳胶颗粒中，直径10-30nm的乳胶颗粒占总体积的10-30%，30-60nm的乳胶颗粒占总体积的40-60%，60-100nm的乳胶颗粒占总体积的20-30%，试剂R1与试剂R2体积比为4：1。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述鼠抗人心型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体乳胶粒子中的乳胶颗粒中，直径10-30nm的乳胶颗粒占总体积的10%，30-60nm的乳胶颗粒占总体积的60%，60-100nm的乳胶颗粒占总体积的30%。3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于所述鼠抗人心型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体乳胶粒子中的乳胶颗粒中，直径10-30nm的乳胶颗粒占总体积的30%，30-60nm的乳胶颗粒占总体积的40%，60-100nm的乳胶颗粒占总体积的30%。4.一种权利要求1-3中任一项所述的试剂盒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)制备试剂R1：将各组分溶解于蒸馏水或双蒸水中，混合均匀，定容；(2)制备试剂R2：将试剂R2中的Tris缓冲液、牛血清白蛋白、烷基糖苷APG0810、甘露醇、聚乙二醇对异辛基苯基醚溶解于蒸馏水或双蒸水中，混合均匀，后向溶液中加入鼠抗人心型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体乳胶粒子，充分搅拌，混合均匀，定容。2CN105911297A说明书1/13页胶乳增强免疫比浊法检测心型脂肪酸结合蛋白的试剂盒技术领域[0001]本发明涉及医学检测技术领域，特别涉及一种心型脂肪酸结合蛋白检测试剂盒，还涉及所述心型脂肪酸结合蛋白检测试剂盒的制备方法。背景技术[0002]心型脂肪酸结合蛋白(hFABP)是心脏中富含的一种新型小胞质蛋白。它具有高度心脏特异性(也就是主要在心脏组织中表达)，但在心脏以外的组织中也有低浓度表达。心肌缺血性损伤出现后，hFABP可以早在胸痛发作后1-3小时在血液中被发现，6-8小时达到峰值而且水平在24-30小时内恢复正常。心脏脂肪酸结合胞质蛋白由132个氨基酸组成，分子量为15kDa。[0003]hFABP在血清中的正常范围根据试验和方法而定。1991年，Tanaka等人报告正常范围为0.0-2.8ng/mL；1991年，Tsuji等人报告正常范围为0.0-0.6ng/mL，而1997年，Wodzig等人认为正常范围是0.3-5ng/mL。1995年，Ohkaru等人报告100位健康受试者的男女平均血清hFABP水平分别为3.60±1.73和3.73±1.92ng/mL。在近期Hasegawa等人的报告中，儿童的基线血清hFABP水平与以前报道的成人基线血清hFABP水平一致(平均值＝3.8，范围＝1.9-5.5ng/mL)。在不同研究中临界浓度不同，从6.2ng/mL到19ng/mL。生理血清hFABP浓度