基于兔单克降抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106546741A(43)申请公布日2017.03.29(21)申请号201610929923.4(22)申请日2016.10.31(71)申请人浙江大学地址310058浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号(72)发明人郑晓冬李洪波楚强(74)专利代理机构杭州中成专利事务所有限公司33212代理人金祺(51)Int.Cl.G01N33/577(2006.01)G01N33/543(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图1页(54)发明名称基于兔单克降抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒(57)摘要本发明公开了一种基于兔单克隆抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒。本发明包括盒体和设在盒体内的96孔酶标板以及试剂,96孔酶标板内包被有黄体酮包被抗原，盒内的试剂如下:(1)洗涤浓缩液；(2)稀释浓结液；(3)黄体酮标准溶液；(4)黄体酮抗体；(5)辣根过氧化物酶标羊抗兔抗体；(6)底物稀释液；(7)底物；(8)底物显色液；(9)反应终止液。本发明适用于牛奶、猪尿等样本中黄体酮残留的检测。该试剂盒能同时检测大批量样本,方便又快速，对现场监控痕量分析具有十分重要的现实意义；同时使检测成本大大降低，具有潜在的经济价值。CN106546741ACN106546741A权利要求书1/1页1.基于兔単克隆抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒，其特征在于：包括盒体和设在盒体内的96孔酶标板以及试剂，96孔酶标板内包被有黄体酮包被抗原；所述盒内的试剂包括：洗涤浓缩液，稀释浓缩液，黄体酮标准溶液，黄体酮抗体，辣根过氧化物酶标羊抗兔抗体，底物稀释液，底物，底物显色液及反应终止液。2.根据权利要求1所述的基于兔单克降抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒，其特征在于：所述的黄体酮包被抗原为黄体酮与卵清蛋白的偶联产物，黄体酮包被抗原能与抗黄体酮抗体特异性结合。3.根据权利要求1所述的基于兔单克隆抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒，其特征在于：所述的洗涤浓缩液的组成为：氣化钠7～9g、磷酸二氧钾0.1～0.3g、磷酸氢二钠3～5g、氯化钾0.1～0.3g、吐温200.5～1ml和去离子水。4.根据权利要求1所述的基于兔单克降抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒，其特征在于：所述的稀释浓缩液的组成为：氯化钠7～9g、磷酸二氢钾0.1～0.3g、磷酸氢二钠3～5g、氯化钾0.1～0.3g和去离子水。5.根据权利要求1所述的基于兔単克隆抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒，其特征在于：所述的黄体酮抗体是兔单克降抗体，是以兔子为免疫动物，经过杂交瘤技术以及重组抗体技术最终得到的。6.根据权利要求1所述的基于兔单克降抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒，其特征在于：所述的底物显色液为3，3，5，5一四甲基联苯胺配制液。7.根据权利要求1所述的基于兔单克降抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒，其特征在于：所述的底物稀释液为pH5.0柠檬酸缓冲液，pH5.0柠檬酸缓冲液的组成为：3～6g柠檬酸、6～9g磷酸氢二钠和去离子水。8.根据权利要求1所述的基于兔单克隆抗体的黄体酮残留分析晦联免疫吸附试剂盒，其特征在于：所述的黄体酮标准溶液的浓度为：10ng/mL、5ng/mL、2.5ng/mL、1.25ng/mL、0.625ng/mL或0.3125ng/mL。9.根据权利要求1所述的基于兔单克降抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒，其特征在于：所述的底物为过氧化氢或过氧化脲。10.根据权利要求1所述的基于兔单克降抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒，其特征在于：所述的反应终止液为2M硫酸或盐酸。2CN106546741A说明书1/6页基于兔单克降抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒技术领域[0001]本发明涉及试剂盒，尤其涉及一种基于兔单克降抗体的黄体酮残留分析酶联免疫吸附试剂盒。背景技术[0002]黄体酮(progesterone)，其属于广谱抗生素，对革兰氏阳性菌、阴性菌均有良好的抑制作用，因而广泛应用于畜牧、水产养殖业。但在动物性食品内残留的黄体酮对人体的健康具有潛在的危害。为此，世界上许多国家均制定了黄体酮的最高残留标准，严格限制其使用。为了适应加入WTO后的国际竞争与挑战，必须建立起一种具有自主知识产权的快速检测方法。因此开发出一种简单快速，适用于黄体酮残余现场监控的痕量分析具有十分重要的现实意义。[0003]目前对黄体酮残宙检测的主要方法有色谱法、微生物法等。其中HPLC法、气相色谱以及液相色谱一串联质谱等方法虽然具有灵敏、准确等特点，但该类方法前处理较复杂，所需仪器昂贵，而且需要有熟练的技术人员，难以在基层工作中普及推广。微生物检测方法操作简单，费用低，但耗时