一种检测5型牛腺病毒的核酸组合、试剂盒及应用与检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利(10)授权公告号CN109266787B(45)授权公告日2022.02.11(21)申请号201811452016.0C12Q1/6851(2018.01)(22)申请日2018.11.29C12N15/11(2006.01)C12R1/93(2006.01)(65)同一申请的已公布的文献号申请公布号CN109266787A审查员夏士博(43)申请公布日2019.01.25(73)专利权人成都海关技术中心地址610000四川省成都市武候区一环路南四段28号(72)发明人安微陈世界李丹丹林华车颖欣张婧杨苗(74)专利代理机构北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)11463代理人程晓(51)Int.Cl.权利要求书1页说明书6页C12Q1/70(2006.01)序列表1页附图2页(54)发明名称一种检测5型牛腺病毒的核酸组合、试剂盒及应用与检测方法(57)摘要本发明提供了一种检测5型牛腺病毒的核酸组合、试剂盒及应用与检测方法，属于生物技术及分子生物技术领域。本发明提供的检测5型牛腺病毒的核酸组合，针对5型腺病毒设计，针对性强，特异性强，灵敏度高；将上述核酸组合用于检测的试剂盒中，能方便检测，提高检测的稳定性；通过利用该核酸组合进行检测，提高检测结果的可信度，具有较好的实际应用价值。CN109266787BCN109266787B权利要求书1/1页1.一种检测5型牛腺病毒的核酸组合，其特征在于，所述核酸组合包括检测引物对和检测探针；所述检测引物对的碱基序列如SEQIDNo.1‑2所示；所述检测探针的碱基序列如SEQIDNo.3所示；所述检测探针5’端包括荧光报告基团，所述检测探针3’端包括荧光淬灭基团。2.根据权利要求1所述的检测5型牛腺病毒的核酸组合，其特征在于，所述核酸组合还包括阳性模板，所述阳性模板的碱基序列如SEQIDNo.4所示。3.根据权利要求2所述的检测5型牛腺病毒的核酸组合，其特征在于，所述荧光报告基团为MGB、VIC、TET、JOE、HEX、ROX、RED610、TEXASRED、RED670、NED、FAM、CY3、CY5、TAMRA、BHQ1、BHQ2或BHQ3中的一种。4.根据权利要求3所述的检测5型牛腺病毒的核酸组合，其特征在于，所述荧光淬灭基团为MGB、VIC、TET、JOE、HEX、ROX、RED610、TEXASRED、RED670、NED、FAM、CY3、CY5、TAMRA、BHQ1、BHQ2或BHQ3中的一种；所述荧光报告基团不同于所述荧光淬灭基团。5.一种检测5型牛腺病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1‑4任一项所述的检测5型牛腺病毒的核酸组合。6.根据权利要求5所述的检测5型牛腺病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括基因组提取试剂、PCR缓冲液、TaqDNA聚合酶、dNTPs或Mg2+中的至少一种。7.根据权利要求6所述的检测5型牛腺病毒的试剂盒，其特征在于，所述基因组提取试剂包括蛋白酶K。2CN109266787B说明书1/6页一种检测5型牛腺病毒的核酸组合、试剂盒及应用与检测方法技术领域[0001]本发明涉及生物技术及分子生物技术领域，具体而言，涉及一种检测5型牛腺病毒的核酸组合、试剂盒及应用与检测方法。背景技术[0002]牛腺病毒(Bovineadenovirus，BAV)，为腺病毒科哺乳动物腺病毒属的成员。目前已报道牛腺病毒总共有10个血清型，BAV‑1、‑2、‑3、‑9、‑10型牛腺病毒属于哺乳动物腺病毒属，而BAV‑4、‑5、‑6、‑7和‑8型属于腺胸腺病毒属。牛腺病毒5型的基因组是双链的DNA分子，感染牛的临床症状主要包括结膜炎、肺炎、腹泻和多发性关节炎，被感染犊牛出现发热和食欲不振等症状及肺脏实变的肉眼病变。近年来，我国许多地区牛群中爆发了牛呼吸道传染病，死亡率达10％‑50％，造成严重的经济损失。对该疫情进行流行病学调查和分析，表明牛腺病毒在其中起了很重要的作用。牛腺病毒的快速检测是控制和消灭该病的前提，但腺病毒的常规检测方法一般分为免疫学方法、生物学试验、分子生物学诊断技术等方法，但是都存在难以早期诊断、敏感度第等缺点。发明内容[0003]一方面，本申请实施例提供了一种检测5型牛腺病毒的核酸组合，该核酸组合能较为灵敏的识别5型牛腺病毒，特异性较强；还提供一种检测5型牛腺病毒的试剂盒，方便检测；将试剂盒应用于检测，能提高检测效率，检测精度和准确性和稳定性都能得到提高。[0004]为了实现本发明的上述目的，采用以下技术方案：[0005]一种检测5型牛腺病毒的核酸组合，核酸组合包括检测引物对和检测探针；检测引物对的碱基序列如SEQIDNo.1‑2所示；检测探针的碱基序列如SEQIDNo.3所示；检测探