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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105588905A(43)申请公布日2016.05.18(21)申请号201510497959.5(22)申请日2015.08.13(71)申请人北京工商大学地址100048北京市海淀区阜成路33号(72)发明人董银卯王巧娥钱洁谢丹(74)专利代理机构北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司11139代理人孙皓晨费碧华(51)Int.Cl.G01N30/88(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图2页(54)发明名称一种芦荟多糖指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱(57)摘要本发明公开了一种芦荟多糖指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱,属于中药及其制品和功能食品、化妆品原料及其制品的指纹图谱技术领域。本发明芦荟多糖指纹图谱的构建方法包括从芦荟叶中提取芦荟多糖,将提取的芦荟多糖制备成GPC分析供试液,经凝胶渗透色谱仪分离检测,获得芦荟多糖的指纹图谱。本发明还提供了由该构建方法得到的芦荟多糖标准指纹图谱,该图谱可作为检测库拉索芦荟多糖的一种工具,用于同一产地不同批次或不同产地库拉索芦荟凝胶制品的内在质量控制。本发明供试液制备简便,GPC色谱条件容易实现,指纹图谱测定方法精密度高,重现性和稳定性好。CN105588905ACN105588905A权利要求书1/1页1.一种芦荟多糖指纹图谱的构建方法,其特征在于,从芦荟叶中提取芦荟多糖,将提取的芦荟多糖制备成GPC分析供试液,经凝胶渗透色谱仪分离检测,获得芦荟多糖的指纹图谱。2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)芦荟多糖的制备取库拉索芦荟鲜叶适量,洗净后去皮,芦荟凝胶清洗、切块,用搅拌机初步破碎后置于闪式提取器进一步匀浆处理,得凝胶匀浆液;凝胶匀浆液减压抽滤,收集滤液进行浓缩,浓缩液冷却后加入乙醇溶液,4℃冷藏过夜,离心得沉淀;待沉淀中的乙醇挥干后,放入-40℃冰箱冷冻,然后置于真空冷冻干燥机中冻干,冻干粉研磨,即得芦荟多糖;(2)芦荟多糖GPC分析供试液的制备精确称取步骤(1)制备的芦荟多糖适量,用NaNO3溶液溶解后,在4℃冰箱放置12h后取出,恢复至室温后用滤膜过滤,即得芦荟多糖GPC分析供试液;(3)芦荟多糖的GPC分析精密吸取步骤(2)制备的芦荟多糖GPC分析供试液,经凝胶渗透色谱仪分离检测;其中,将ShodexSUGARKS-805色谱柱和KS-803色谱柱串联使用,流动相为NaNO3溶液,采用等度洗脱得到芦荟多糖的指纹图谱。3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,步骤(1)中所述的浓缩为60℃旋蒸浓缩;所述的浓缩液冷却后加入乙醇溶液为浓缩液冷却后边搅拌边加入无水乙醇至其体积分数为80%;所述的离心为10000rad/min离心15min。4.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,步骤(2)中所述的芦荟多糖GPC分析供试液的制备为:精确称取步骤(1)制备的芦荟多糖适量,用含质量分数为0.2‰NaN3的0.1mol/LNaNO3溶液定容到7.0mg/mL,在4℃冰箱放置12h后取出,恢复至室温后用0.22μm滤膜过滤,即得芦荟多糖GPC分析供试液。5.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,步骤(3)中所述的芦荟多糖的GPC分析的条件为:色谱柱为按照ShodexSUGARKS-805色谱柱在前,KS-803色谱柱在后的顺序将两色谱柱串联使用;流动相为含质量分数为0.2‰NaN3的0.1mol/LNaNO3溶液,洗脱速度为0.8ml/min;色谱柱和凝胶渗透色谱仪的示差折光检测器的温度分别为60℃和50℃;进样量为50μL。6.根据权利要求1-5任一项所述的构建方法得到的芦荟多糖标准指纹图谱,其特征在于,比较同一产地不同批次或不同产地芦荟多糖样品的指纹图谱,确定共有特征峰4个,以2号峰作为参照峰,计算指纹图谱中各特征峰的相对保留时间,各特征峰的相对保留时间的相对标准偏差RSD均小于3%;即:1号峰,平均相对保留时间为0.468,RSD为0.8~2.24%;2号峰,平均相对保留时间为0.490,RSD为0;3号峰,平均相对保留时间为0.508,RSD为0.01~0.02%;4号峰,平均相对保留时间为0.523,RSD为0.02~0.06%。2CN105588905A说明书1/8页一种芦荟多糖指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱技术领域[0001]本发明涉及一种芦荟多糖指纹图谱的构建方法,具体涉及一种芦荟多糖的GPC指纹图谱的构建方法以及由此方法所得到的芦荟多糖标准指纹图谱,属于中药及其制品和功能食品、化妆品原料及其制品的指纹图谱技术领域。背景技术[0002]库拉索芦荟(AloebarbadensisMill或AloeveraL.)是百合科芦荟属植物[ChinaRur