一种红掌多倍体的高效诱导方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108184661A(43)申请公布日2018.06.22(21)申请号201810074465.X(22)申请日2018.01.25(71)申请人中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所地址571737海南省儋州市宝岛新村(72)发明人冷青云王存黄少华牛俊海(74)专利代理机构海口翔翔专利事务有限公司46001代理人张耀婷(51)Int.Cl.A01H1/08(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图3页(54)发明名称一种红掌多倍体的高效诱导方法(57)摘要本发明公开了一种红掌多倍体的高效诱导方法，包括以下步骤：(1)愈伤组织预培养；(2)多倍体诱导；(3)愈伤组织分化培养；(4)生根培养；(5)驯化栽培；本发明操作简单，稳定性高，诱导率高，鉴定效率高，育种周期短。CN108184661ACN108184661A权利要求书1/1页1.一种红掌多倍体的高效诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)愈伤组织预培养：取红掌愈伤组织接种于预培养基中15d，待愈伤组织生长出凸起状生长点时备用；所述预培养基成分为1/2MS+1g/L花宝1号+2～3mg/L6-BA+0.5～1mg/LNAA+0.5～2mg/L2,4-D+0.5～1.0mg/LTDZ+7g/L琼脂粉+30g/L蔗糖，pH值为5.8～6.2；(2)多倍体诱导：将步骤(1)预培养获得的愈伤组织切成0.5cm×0.5cm大小的团块浸泡于100～400mg/L的秋水仙碱溶液中振荡培养5～15d；(3)愈伤组织分化培养：将步骤(2)中处理过的愈伤组织经无菌水清洗后接种至分化培养基中，分化培养基成分为1/2MS+1g/L花宝1号+2mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+7g/L琼脂粉+30g/L蔗糖，pH值为5.8～6.2；(4)生根培养：将步骤(3)中获得的分化苗接种至生根培养基中，生根培养基成分为1/2MS+0.2mg/LNAA+0.5g/LAC+7g/L琼脂粉+30g/L蔗糖，pH值为5.8～6.2；每30d天继代一次，继代3次后出瓶驯化栽培；(5)驯化栽培：将步骤(4)中获得的生根苗移栽至装有1:1:1的椰糠、蛭石、泥炭土混合基质的穴盘种，置于温室中培养60d，温室环境控制在温度24～26℃，湿度保持在80％～95％。2CN108184661A说明书1/4页一种红掌多倍体的高效诱导方法技术领域[0001]本发明属于植物育种领域，涉及一种植物多倍体的诱导方法，具体涉及一种红掌多倍体的高效诱导方法。背景技术[0002]红掌(AnthuriumandraeanumLind)又名安祖花、花烛等，为天南星科(Araceae)安祖花属(Anthurium)多年生草本植物，原产于哥伦比亚、厄瓜多尔、哥斯达黎加等地，喜温暖、湿热的环境。花型奇特，花色多样的优点，深受世界各国人民的喜。近年来我国红掌产业发展迅猛，目前已成为世界主产地和消费地之一。[0003][0004]红掌新品种创制主要手段是有性杂交和后代选择。然而传统杂交育种周期比较长，一个品种的选育通常耗时6～8年，且花烛属是引进种质，在国内无原生种分布，世界各国也加强了对野生资源的保护，这在很大程度上限制了红掌育种亲本来源。目前国内种质资源多为国外公司推广的商业品种，遗传基础相对狭窄，这些品种间的杂交后代往往会出现同质性，很难获得更特异的新品系。此外，目前红掌育种目标主要关注花色、株型等观赏性状，在抗病虫害、抗逆境胁迫等方向涉及甚少。上述问题，传统的杂交手段不能有效解决，开展其他育种技术研究有非常紧迫的现实意义。[0005]多倍体植物常表现出花斑多、花色艳丽、花期长、叶片肥厚、抗性增强等特点。观赏价值和经济价值均得到普遍提高。利用染色体加倍，可以人工创造新的植物类型，用多倍体做亲本，有利于克服远缘杂交不亲和性。[0006]因此多倍体育种是观赏植物常用的育种途径之一，如何高效获得多倍体种质就尤为关键。发明内容[0007]本发明的目的是提供了一种操作简单，稳定性高，诱导率高，鉴定效率高，育种周期短的红掌多倍体的高效诱导方法。[0008]为了实现上述目的，本发明的技术方案为：提供一种红掌多倍体的高效诱导方法，其中，包括以下步骤：[0009](1)愈伤组织预培养：取红掌愈伤组织接种于预培养基中15d，待愈伤组织生长出凸起状生长点时备用；所述预培养基成分为1/2MS+1g/L花宝1号+2～3mg/L6-BA+0.5～1mg/LNAA+0.5～2mg/L2,4-D+0.5～1.0mg/LTDZ+7g/L琼脂粉+30g/L蔗糖，pH值为5.8～6.2；[0010](2)多倍体诱导：将步骤(1)预培养获得的愈伤组织切成0.5cm×0.5cm大小的团块浸泡于100～40