一种红掌杂种多倍体诱导方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114847157A(43)申请公布日2022.08.05(21)申请号202210639036.9(22)申请日2022.06.07(71)申请人中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所地址570100海南省海口市龙华区学院路4号(72)发明人冷青云李海燕牛俊海黄少华徐世松钟绵嘉(74)专利代理机构海南盛亿专利代理事务所(普通合伙)46005专利代理师吴燕梅(51)Int.Cl.A01H1/08(2006.01)A01C1/00(2006.01)A01G31/00(2018.01)权利要求书1页说明书6页附图4页(54)发明名称一种红掌杂种多倍体诱导方法(57)摘要本发明公开了一种红掌杂种多倍体诱导方法，包括杂交种子的获取；种子萌发，黑暗诱导种子萌发；进行光照多倍体诱导培养；杂交种子苗光照培养；杂交种子苗倍性鉴定。通过黑暗培养诱导种子萌发，再采用化学试剂处理杂交种子，使植物染色体加倍，在遗传水平上改变品种特性，获得不同遗传背景的多倍体种子，进而进行光照萌发培养，使植物多倍体不仅具有长势壮、生长迅速、观赏期延长、综合抗性强等优势，而且能使植物育性得到提高，可为开展大规模红掌杂交育种提供新种质，有利于获得性状更优良的新品种，本发明构建的以红掌杂交种子为诱导材料进行的倍性育种体系，为高效获得多倍体种质的研究奠定了基础。CN114847157ACN114847157A权利要求书1/1页1.一种红掌杂种多倍体诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)杂交种子的获取：选取不同二倍体品种的母本和父本进行杂交，授粉套袋培育后，采集果肉变黄的成熟浆果；(2)种子萌发：将成熟浆果清水清洗，洗去果肉后用无菌水冲洗干净，然后将其平铺在装有珍珠岩和泥炭土混合基质的培养盒里，将培养盒密封置于人工气候箱中进行黑暗培养3～5d，诱导种子萌发；(3)多倍体诱导：将步骤(2)预培养的种子浸泡在浓度为250～1000mg/L秋水仙碱溶液中振荡培养5～15d，清水清洗4～6次后种植于装有珍珠岩和泥炭土混合基质的培养盒里，将培养盒密封置于人工气候箱中进行光照萌发培养，培养光照强度为1800～2200lux；(4)杂交种子苗培养：种子培养经过转绿、下胚轴伸长、长出胚芽、完成萌发过程，长出2片叶片，在萌发过程中每半个月喷施平衡肥，培养光照强度为3800～4200lux，统计萌发率，4个月后移栽至72孔穴盘中；(5)杂交种子苗倍性鉴定：穴盘苗培养60d后生长出的幼嫩叶片经WPB缓冲液裂解后进行流式细胞仪倍性检测，计算多倍体诱导率。2.根据权利要求1所述的一种红掌杂种多倍体诱导方法，其特征在于，所述步骤(1)中，培育120～150d。3.根据权利要求1所述的一种红掌杂种多倍体诱导方法，其特征在于，所述步骤(2)中，珍珠岩和泥炭土的重量比为1:1。4.根据权利要求1所述的一种红掌杂种多倍体诱导方法，其特征在于，所述步骤(2)中，培养温度为24～26℃，相对湿度为70～90％。5.根据权利要求1所述的一种红掌杂种多倍体诱导方法，其特征在于，所述步骤(3)中，培养温度为24～26℃，光周期为10h/14h，相对湿度为70～90％。6.根据权利要求1所述的一种红掌杂种多倍体诱导方法，其特征在于，所述步骤(3)中，秋水仙碱溶液中含有2％的二甲基亚砜。2CN114847157A说明书1/6页一种红掌杂种多倍体诱导方法技术领域[0001]本发明涉及植物多倍体培育技术领域，尤其涉及一种红掌杂种多倍体诱导方法。背景技术[0002]红掌(AnthuriumandraeanumLind)又名火鹤、花烛、安祖花等，为天南星科(Araceae)花烛属(Anthurium)多年生草本植物，原产于南美厄瓜多尔、哥斯达黎加、哥伦比亚等地，喜温暖、湿热的环境。因其花型奇特，花色多样、花期长的优点，深受世界各国人民的喜爱，是世界重要的盆花和切花品种。[0003]近年来我国红掌产业发展迅猛，目前已成为世界主产地和消费地之一。然而国内大规模商业种植的品种主要是国外育种公司育成的品种，国内育种机构推广的品种较少，这主要与红掌新品种选育周期较长和国内缺乏核心种质有关。红掌新品种创制主要手段是有性杂交。然而传统杂交育种周期比较长，一个品种的选育从杂交到选育成功通常需要6～8年，新品种推广还需要3～5年时间。且花烛属原产地为南美州，在国内无原生种分布，世界各国也加强了对野生资源的保护，这在很大程度上限制了红掌育种亲本来源。目前国内种质资源多为国外公司推广的商业品种，遗传基础相对狭窄，这些品种间的杂交后代往往同质性很强，很难获得有突破性的新种质。花烛属有约1500种的原生种，但参与到现代栽培红掌的形成只有少数几个原生种，大部分花烛原生种还没有利用，这主要是由于