小麦常规品种纯度的SSR分子标记检测方法、引物组合及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109777881A(43)申请公布日2019.05.21(21)申请号201811337609.2(22)申请日2018.11.08(71)申请人北京市农林科学院地址100097北京市海淀区曙光花园中路9号(72)发明人庞斌双刘丽华赵昌平刘阳娜张风廷李宏博张立平(74)专利代理机构北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙)11737代理人刘静荣(51)Int.Cl.C12Q1/6895(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书2页说明书7页序列表4页附图2页(54)发明名称小麦常规品种纯度的SSR分子标记检测方法、引物组合及其应用(57)摘要本发明属于农业生物技术领域，具体涉及用于小麦常规品种纯度的SSR分子标记检测方法、引物组合及其应用。本发明以审定小麦品种为材料，筛选适于区分无限扩大的审定小麦品种的SSR引物，以荧光毛细管电泳为主要检测平台，建立了规模化、高通量、快速、准确的小麦品种纯度SSR分子标记检测技术。CN109777881ACN109777881A权利要求书1/2页1.检测小麦常规品种纯度用的SSR分子标记引物组合，其特征在于，所述引物组合由以下10对引物组成：barc80-F:GCGAATTAGCATCTGCATCTGTTTGAG，barc80-R:CGGTCAACCAACTACTGCACAAC；barc324-F:CCAATTCTGCCCATAGGTGA，barc324-R:GAGGAAATAAGATTCAGCCAACTG；barc164-F:TGCAAACTAATCACCAGCGTAA，barc164-R:CGCTTTCTAAAACTGTTCGGGATTTCTAA；cfa2028-F:TGGGTATGAAAGGCTGAAGG，cfa2028-R:ATCGCGACTATTCAACGCTT；gwm161-F:GATCGAGTGATGGCAGATGG，gwm161-R:TGTGAATTACTTGGACGTGG；gwm610-F:CTGCCTTCTCCATGGTTTGT，gwm610-R:AATGGCCAAAGGTTATGAAGG；cfa2123-F:CGGTCTTTGTTTGCTCTAAACC，cfa2123-R:ACCGGCCATCTATGATGAAG；gwm294-F:GGATTGGAGTTAAGAGAGAACCG，gwm294-R:GCAGAGTGATCAATGCCAGA；gwm155-F:CAATCATTTCCCCCTCCC，gwm155-R:AATCATTGGAAATCCATATGCC；gwm304-F:AGGAAACAGAAATATCGCGG，gwm304-R:AGGACTGTGGGGAATGAATG。2.权利要求1所述的SSR分子标记检测小麦常规品种纯度的引物组合在小麦常规品种纯度检测中的应用。3.小麦常规品种纯度的SSR分子标记检测方法，其特征在于，所述检测方法包括使用权利要求1所述的引物组合对待测的小麦品种DNA进行PCR扩增的步骤。4.根据权利要求3所述的小麦常规品种纯度的SSR分子标记检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：(1)提取待测小麦的DNA；(2)以步骤(1)提取的DNA为模板、使用权利要求1所述的引物组合进行PCR扩增；(3)毛细管电泳检测；(4)根据步骤(3)的毛细管电泳结果，判断待测小麦的纯度。5.根据权利要求4所述的小麦常规品种纯度的SSR分子标记检测方法，其特征在于，步骤(4)中，首先判断变异位点是否为非纯合的SSR分子标记位点，将非纯合SSR分子标记位点排除后，若某一待测小麦个体中存在至少2个不同于其他多数待测个体的SSR分子标记位点，则判定所述待测小麦个体为杂株。6.根据权利要求4所述的小麦常规品种纯度的SSR分子标记检测方法，其特征在于，步骤(4)中，当不同的待测小麦个体的同一个位点上携带两种等位变异或两种等位变异的杂合子，且随机分布在不同待测小麦个体中时，则判定所述位点为非纯合SSR分子标记位点。2CN109777881A权利要求书2/2页7.根据权利要求3所述的小麦常规品种纯度的SSR分子标记检测方法，其特征在于，所述引物组合中各个引物的末端标记有荧光基团。3CN109777881A说明书1/7页小麦常规品种纯度的SSR分子标记检测方法、引物组合及其应用技术领域[0001]本发明属于农业生物技术领域，具体涉及小麦常规品种纯度的SSR分子标记检测方法、引物组合及其应用。背景技术[0002]随着我国种植业粮食结构的调整和市场经济的发展，小麦精播用种量显著降低，生产上对种子质量和品种纯度提出了更高的要求。品种纯度是衡量种子质量的重要指标之一，现有的鉴定方法