一种虾青素酯酶及虾青素单体的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111778227A(43)申请公布日2020.10.16(21)申请号201910267026.5C12N1/20(2006.01)(22)申请日2019.04.03C12R1/07(2006.01)(83)生物保藏信息CGMCCNo.170452018.12.27(71)申请人中国农业大学地址100193北京市海淀区圆明园西路2号申请人昆明加加宁生物制品有限公司(72)发明人李平兰汪伯良王瑶刘力谢清武瑞赟张莹(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002代理人王文君陈征(51)Int.Cl.C12N9/16(2006.01)C12P23/00(2006.01)权利要求书1页说明书3页附图2页(54)发明名称一种虾青素酯酶及虾青素单体的制备方法(57)摘要本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种虾青素酯酶及虾青素单体的制备方法。所述虾青素酯酶由贝莱斯芽孢杆菌Lpl-wx发酵即得，所述贝莱斯芽孢杆菌Lpl-wx的保藏编号为CGMCCNo.17045。本发明提供了一种绿色高效的虾青素酯酶，并通过对该酶的制备过程的优化，进一步提高了其对虾青素酯的降解作用，使得降解率达到98.2％的同时，虾青素单体得率达到43.2％。CN111778227ACN111778227A权利要求书1/1页1.一种虾青素酯酶的制备方法，其特征在于，由贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)Lpl-wx发酵即得，所述贝莱斯芽孢杆菌Lpl-wx的保藏编号为CGMCCNo.17045。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵过程中使用的发酵培养基中包括以下质量百分比的组分：葡萄糖0.2％～0.6％和/或Mg2+0.05％～0.1％。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基中还包括酵母浸粉；优选所述酵母浸粉的添加量为0.2％-0.6％。4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基的组分如下：葡萄糖0.8％、酵母浸粉0.6％、无水硫酸镁0.125％、NH4SO40.10％、K2HPO40.10％。5.根据权利要求1～4中任一项所述的方法，其特征在于，所述贝莱斯芽孢杆菌Lpl-wx的接种量为1～2％；优选为1.5％。6.使用权利要求1～5中任一项所述的方法制备而成的虾青素酯酶。7.使用权利要求6所述的虾青素酯酶制备虾青素单体的方法，其特征在于，将所述虾青素酯酶加入含有虾青素酯的原料中进行水解反应即得；所述虾青素酯酶按2～10U/微克总类胡萝卜素添加；优选为4～6U/微克总类胡萝卜素。8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述含有虾青素酯的原料在水解反应前经过乳化剂乳化，所述乳化剂选用吐温-80；优选所述吐温-80与原料粗提物油剂按质量比1:1添加。9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述含有虾青素酯的原料来源于水生动物、水产品的废弃物、雨生红球藻或红发夫酵母。10.根据权利要求7～9中任一项所述的方法，其特征在于，水解反应的条件为：150-200r/min转速下28℃-35℃反应4-6h，反应体系为pH6.0-8.0的磷酸缓冲液。2CN111778227A说明书1/3页一种虾青素酯酶及虾青素单体的制备方法技术领域[0001]本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种虾青素酯酶及虾青素单体的制备方法。背景技术[0002]虾青素(Astaxanthin)，又名虾黄素、虾黄质，是从河鳌虾外壳和鲑鱼中发现的一种红色的天然类胡萝卜素含氧衍生物，化学名称为3,3’-二羟基-4,4’-二酮基-β,β-胡萝卜素。虾青素不仅具有极强的抗氧化活性，同时还具有抗癌、增强免疫及着色等多方面功能，广泛应用于功能食品、医药、化妆品和饲料等的生产中。[0003]虾青素在环境中主要以游离态的虾青素单体和虾青素酯两种形式存在。游离态的虾青素单体极不稳定，易被氧化；虾青素酯相对稳定，在生物体内多以虾青素酯的形式存在。雨生红球藻作为虾青素规模化生产的主要来源，对虾青素的积累量和积累速率远高于其它绿藻类，所含虾青素主要以虾青素酯形式存在，游离虾青素含量极少。虾青素酯在生物体内的吸收和功能不如游离的虾青素单体，因此，探索将虾青素酯转化为游离虾青素的工艺，有利于提高虾青素应用的生物效价，并且为开发具有新的生理功能的虾青素衍生物奠定基础。发明内容[0004]为了解决上述问题，本发明提供了一种虾青素酯酶及其制备方法和应用。[0005]本发明提供以下技术方案：[0006]本发明提供一种虾青素酯酶的制备方法，由贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)Lpl-wx发酵即得，所述贝莱斯芽孢杆菌Lpl-wx于2018年12月27日保藏于中