一种用于猫Chapparvovirus实时荧光定量PCR检测的引物及试剂盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113736923A(43)申请公布日2021.12.03(21)申请号202111202886.4(22)申请日2021.10.15(71)申请人安徽农业大学地址230036安徽省合肥市蜀山区长江西路130号(72)发明人王勇刘勋碧李淑艳刘璇(74)专利代理机构北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙)11562代理人张换君(51)Int.Cl.C12Q1/70(2006.01)C12Q1/6851(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书1页说明书4页序列表1页附图2页(54)发明名称一种用于猫Chapparvovirus实时荧光定量PCR检测的引物及试剂盒(57)摘要本发明公开了一种用于猫Chapparvovirus实时荧光定量PCR检测的引物及试剂盒，属于分子生物学技术领域，所述引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物具有如SEQIDNo.1所示的序列，所述下游引物具有如SEQIDNo.2所示的序列。本发明建立的SYBRGreenI实时荧光定量PCR技术能够在短时间内实现对目的片段的高效扩增，整个反应简单快速，检出率高，重复性好，适合样本量较大的情况下使用，推广力强，本发明的建立可填补相关领域的空白。CN113736923ACN113736923A权利要求书1/1页1.一种用于猫Chapparvovirus实时荧光定量PCR检测的引物，其特征在于，所述引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物具有如SEQIDNo.1所示的序列，所述下游引物具有如SEQIDNo.2所示的序列。2.一种权利要求1所述的用于猫Chapparvovirus实时荧光定量PCR检测的引物的应用，其特征在于，所述应用为将所述引物用于猫Chapparvovirus实时荧光定量PCR检测。3.一种用于猫Chapparvovirus的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的用于猫Chapparvovirus实时荧光定量PCR检测的引物。4.根据权利要求3所述的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述实时荧光定量PCR试剂盒还包括DNA荧光染料。5.根据权利要求4所述的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述DNA荧光染料为SYBRGreenⅠ。2CN113736923A说明书1/4页一种用于猫Chapparvovirus实时荧光定量PCR检测的引物及试剂盒技术领域[0001]本发明涉及分子生物学技术领域，特别是涉及一种用于猫Chapparvovirus实时荧光定量PCR检测的引物及试剂盒。背景技术[0002]细小病毒科病毒为二十面体结构，无囊膜的单链DNA病毒，其基因组大小约为4‑6Kb。国际病毒分类委员会将细小病毒科划分为三个亚科，即Densovirinae，Hamaparvovirinae和Parvovirinae。FCPV属于Hamaparvovirinae亚科中的Chaphamaparvovirus属。Chaphamaparvovirus属的病毒成员已被发现可以感染多种脊椎动物，包括大鼠、小鼠、蝙蝠、犬、猪、鸡、火鸡等。目前已有FCPV与猫腹泻相关的报道。[0003]目前，对于新发病毒进行分子流行病学检测采用的方法有PCR方法和实时荧光定量PCR方法。荧光定量PCR方法是在普通PCR的基础上，在扩增反应体系中加入一对特异性引物的同时再加入一个特异性的荧光探针，使得基于SYBRGreenⅠ的实时荧光定量PCR技术具有特异性高、灵敏性强、重复性好等优点，并且具有直观的反应结果，被广泛用于病毒检测。然而，目前还没有将SYBRGreen用于检测FCPV的报道。发明内容[0004]本发明的目的是提供一种用于猫Chapparvovirus实时荧光定量PCR检测的引物及试剂盒，以解决上述现有技术存在的问题，本发明建立的SYBRGreenI实时荧光定量PCR技术能够在短时间内实现对目的片段的高效扩增，整个反应简单快速，检出率高，重复性好，适合样本量较大的情况下使用，推广力强，本发明的建立可填补相关领域的空白。[0005]为实现上述目的，本发明提供了如下方案：[0006]本发明提供一种用于猫Chapparvovirus实时荧光定量PCR检测的引物，所述引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物具有如SEQIDNo.1所示的序列，所述下游引物具有如SEQIDNo.2所示的序列。[0007]本发明还提供一种上述的用于猫Chapparvovirus实时荧光定量PCR检测的引物的应用，所述应用为将所述引物用于猫Chapparvovirus实时荧光定量PCR检测。[0008]本发明还提供一种用于猫Chapparvovirus的实时荧光定量PCR试剂盒，包括上