一种Bt蛋白Cry53A及其基因和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115197305A(43)申请公布日2022.10.18(21)申请号202110389006.2C12N15/70(2006.01)(22)申请日2021.04.12C12N1/21(2006.01)C12N15/82(2006.01)(71)申请人四川农业大学A01H5/00(2018.01)地址611130四川省成都市温江区惠民路A01N63/50(2020.01)211号A01N63/23(2020.01)(72)发明人王世全郑爱萍李平罗莲A01P7/00(2006.01)王玲霞梁越洋邓其明李双成C12R1/19(2006.01)邹挺朱军刘怀年王爱军金京花(74)专利代理机构池州优佐知识产权代理事务所(普通合伙)34198专利代理师袁辉志(51)Int.Cl.C07K14/325(2006.01)C12N15/32(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图4页(54)发明名称一种Bt蛋白Cry53A及其基因和应用(57)摘要本发明涉及生物技术领域，且公开了一种Bt蛋白Cry53A，所述氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。该Bt蛋白Cry53A及其基因和应用，提供Cry53A蛋白是一种Bt蛋白，对草地贪夜蛾有极强的杀害毒力，将其用于制备转基因植物，能够对抗草地贪夜蛾对作物的危害，并降低农药的使用量，降低成本，减少环境污染，在本发明的效果验证试验过程中，也没有发现害虫对该蛋白产生抗性的情况。因此，本发明的Bt蛋白Cry53A具有重要的经济价值和应用前景，适合大规模应用于提高植物的抗虫性中。CN115197305ACN115197305A权利要求书1/1页1.一种Bt蛋白Cry53A，其特征在于，所述氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。2.根据权利要求1所述Bt蛋白Cry53A，其特征在于，所述Bt蛋白的氨基酸序列为SEQIDNO.2所示的氨基酸序列经取代、缺失和/或添加一个或多个氨基酸，且表达相同功能蛋白质的氨基酸序列。3.一种根据权利要求1或2所述Bt蛋白Cry53A的基因，其特征在于，所述核苷酸序列如；或SEQIDNO.1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或添加一个或多个核苷酸，且能编码相同功能蛋白质的核苷酸序列。4.一种含有权利要求3所述基因的重组表达载体。5.一种含有权利要求4所述表达载体的宿主细胞。6.根据权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌。7.一种含有权利要求1或2所述Bt蛋白的杀虫剂。8.权利要求1或2所述Bt蛋白在提高植物抗虫性中的应用。9.权利要求2所述的基因在培育转基因植物、制备杀虫剂或提高植物抗虫性中的应用。2CN115197305A说明书1/6页一种Bt蛋白Cry53A及其基因和应用技术领域[0001]本发明涉及生物技术领域，具体为一种一种分离克隆自苏云金芽孢杆菌的抗草地贪夜蛾的蛋白、其编码基因及其应用。背景技术[0002]草地贪夜蛾又称为秋行军虫、秋黏虫、草地夜蛾和伪粘虫等，属于鳞翅目(Lepidoptera)夜蛾科(Noctuidae)灰翅夜蛾属(Spodoptera)的一种蛾，草地贪夜蛾具有适生区域广、迁飞能力和繁殖能力强、寄主范围广和取食量大等特性。[0003]草地贪夜蛾最早出现于美洲，包括美国、巴西和墨西哥等地区，该物种一直被认为是一种偶发但极具破坏性的农业害虫，最早于1797年在美国佐治亚州被记载为有害害虫，一般认为草地贪夜蛾不能在热带和亚热带以外的地区越冬，但是，在温度适宜的夏季和秋季，它也可以在温带生存，1977年，以色列的Wiltshire认为草地贪夜蛾已经入侵并形成中东种群，并且根据其对性信息素的反应差异认为，以色列的草地贪夜蛾来源于美国‑加勒比海地区，而不是来自于南美的巴西，随后，草地贪夜蛾先后入侵欧洲、非洲和亚洲等地，成为危害全球粮食生产的重大农业害虫，2016年，草地贪夜蛾在非洲首次被发现，2018年，印度首次确认草地贪夜蛾入侵并危害玉米、甘蔗和高粱等作物，目前全球共有96个国家或地区正在或曾经遭受其为害，成为全球预警的粮食作物毁灭性害虫。[0004]草地贪夜蛾属于多食性昆虫，可取食禾本科、茄科、十字花科、石竹科和菊科等共计76科，包括玉米、水稻、高粱、小麦、大豆、苜蓿、大麦、荞麦、棉花、燕麦、粟、花生、黑麦草、甜菜、苏丹草、烟草、番茄、马铃薯和洋葱等超过300种植物，但主要为害禾本科的水稻和玉米，可造成严重的产量损失，自2016年草地贪夜蛾在非洲发生以来，在12个非洲国家每年造成玉米减产约830‑2060万吨，相当于0.4‑1亿人口的粮食损失，在南美的阿根廷，其为害可造成玉米减产72％，即便在防控条件好的发达国家美国，其在佛罗里达州的危害也可造成玉米减产20％，更严重的是，仅2‑