一种樟树CcLis基因及其表达蛋白和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115851790A(43)申请公布日2023.03.28(21)申请号202211314894.2A01H5/00(2018.01)(22)申请日2022.10.25A01H6/82(2018.01)C12R1/01(2006.01)(71)申请人江西省林业科学院地址330032江西省南昌市青山湖区蛟桥镇枫林大道1629号(72)发明人郑永杰伍艳芳汪信东刘新亮张月婷章挺温世钫郭捷(74)专利代理机构南京智转慧移知识产权代理有限公司32649专利代理师金伟(51)Int.Cl.C12N15/60(2006.01)C12N9/88(2006.01)C12N15/84(2006.01)C12N1/21(2006.01)权利要求书1页说明书3页序列表（电子公布）附图1页(54)发明名称一种樟树CcLis基因及其表达蛋白和应用(57)摘要本发明公开了一种樟树CcLis基因及其表达蛋白和应用，属于植物基因工程技术领域。本申请对诱导表达的重组蛋白分别添加底物GPP，进行重组蛋白催化活性检测，通过GC‑MS检测成分，结果表明本发明提供的CcLis是樟树芳樟醇合成的关键酶，在进行体外催化生产芳樟醇方面具有重要的应用价值。本申请利用注射法将已含pCambia1300S‑CcLis植物过表达载体的农杆菌转入受体材料中，瞬时转化后CcLis基因在受体材料中大量表达。表明本发明提供的CcLis是芳樟醇合成酶基因，在植物基因工程中，作为芳樟醇合成的关键基因，在促进植物芳樟醇合成方面具有重要的应用价值，因此本发明具有良好的应用前景。CN115851790ACN115851790A权利要求书1/1页1.一种樟树CcLis基因，其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.权利要求1所述的樟树CcLis基因的表达蛋白，其氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。3.含有权利要求1所述的樟树CcLis基因的表达盒、载体、宿主菌或细胞系。4.根据权利要求3所述的含有樟树CcLis基因的载体，其特征在于，所述的载体是植物表达载体。5.根据权利要求4所述的含有樟树CcLis基因的载体，其特征在于，所述的植物表达载体是pCambia1300S‑CcLis。6.权利要求1所述的樟树CcLis基因在植物育种或促进植物芳樟醇合成中的应用。7.根据权利要求6所述的樟树CcLis基因在促进植物芳樟醇合成中的应用，其特征在于，具体包括以下步骤：1)构建樟树CcLis基因的载体；2)将所构建的樟树CcLis基因的载体转化到植物中；3)培育筛选得到芳樟醇含量提高的转基因植物。8.权利要求1所述的樟树CcLis基因在制备CcLis蛋白中的应用。9.根据权利要求6所述的樟树CcLis基因在制备CcLis蛋白中的应用，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)利用樟树CcLis基因构建表达载体；(2)将所得表达载体转化到宿主菌或细胞中；(3)培养所得宿主菌或细胞使其表达CcLis蛋白。10.权利要求2所述的樟树CcLis基因的表达蛋白在制备芳樟醇中的应用。2CN115851790A说明书1/3页一种樟树CcLis基因及其表达蛋白和应用技术领域[0001]本发明属于植物基因工程技术领域，更具体地说，涉及一种樟树CcLis基因及其表达蛋白和应用。背景技术[0002]我国是香化产品的生产大国和消费大国，2020年香化市场生产销售额接近5000亿元。芳樟醇是香化产业香料原料中使用频率最高、用量最大的香料原料，每年需求量高达10000t。芳樟醇(C10H18O)又名沉香醇，无色透明液体，属单萜类化合物。在香水配方中，芳樟醇是使用频率最高的一种香料，也可用来配制食用香精，每年全球用于配制香精的芳樟醇达10000吨；芳樟醇还有医疗保健的功效，具有抗菌、抗病毒和镇静等作用，自古以来民间就有芳樟醇的挥发油或植物作为催眠和镇静剂使用；另外，芳樟醇还可作为除臭剂和杀虫剂。[0003]樟树(Cinnamomumcamphora)是世界珍贵的芳香油类经济林树种。我国是世界上生产樟树精油最多的国家，其产量约占世界80％。根据叶精油主要组成成分，可将樟树划分为芳樟醇型、樟脑型、桉油素型、异橙花叔醇型、龙脑型等5个主要化学类型芳樟醇型樟树又称芳樟，其叶精油的主要成分为单萜类芳樟醇，含量一般可达85％以上。与其他芳樟醇植物资源(如芫荽、薰衣草、白兰花、金银花等)相比，芳樟具有含量高的优点，是生产天然芳樟醇精油的最理想植物材料之一。目前关于樟树精油的研究主要有成分的提取与鉴定，在樟树精油生物合成研究中尚未有芳樟醇合成酶基因克隆和功能鉴定的相关研究报道。发明内容[0004]针对现有技术存在的上述问题，本发明所要解决的技术问题在于提供一种樟树CcLis基因。本发明所要解决的另一技术