一种测定植株中硼含量的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115389491A(43)申请公布日2022.11.25(21)申请号202210966694.9(22)申请日2022.08.12(71)申请人重庆三峡农业科学院（重庆市万州区甘宁蚕种场）地址404155重庆市万州区厦门路600号(72)发明人邱诗春周静徐燕(74)专利代理机构北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙)11531专利代理师王文娇(51)Int.Cl.G01N21/78(2006.01)G01N1/28(2006.01)G01N1/44(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图1页(54)发明名称一种测定植株中硼含量的方法(57)摘要本发明公开了一种测定植株中硼含量的方法，包括甲基红指示剂、缓冲液、0.025MEDTA溶液、甲亚胺溶液，本发明采取湿灰化法进行处理：在试样中加入HNO3：HClO4=15ml：3ml，插上小漏斗，调节可控温电炉保持溶液微沸并摇动三角瓶防止溶液溢出，消煮2小时左右，至溶液澄清，约25ml为止，若提前一天将HNO、HClO加入试样浸~34泡一晚，可缩短消煮时间半小时左右，植物试样经湿灰化法处理后，在弱酸性条件下，试样溶液中硼与甲亚胺‑H酸生成黄色复合物，用分光光度计在波长430nm处测定吸光度，吸光度与硼含量成正比，与标准系列比较能定量出试样中硼含量。CN115389491ACN115389491A权利要求书1/1页1.一种测定植株中硼含量的方法，其特征在于：包括甲基红指示剂、缓冲液、0.025MEDTA溶液、甲亚胺溶液；所述甲基红指示剂：称取0.1g甲基红,用乙醇溶解稀释到100ml,可得1g/L的所述甲基红指示剂；所述缓冲液：称取250g醋酸铵于500ml去离子水中，慢慢加入冰醋酸（约100ml），不断搅拌，使溶液的pH值调节至5.5；所述0.025MEDTA溶液：称取9.3gEDTA二钠盐溶于去离子水中，并用去离子水定容至1000ml；所述甲亚胺溶液：称取0.5g甲亚胺‑H和1.0g抗坏血酸于10ml去离子水中，在30℃水浴上加热，使其溶解，冷却后用去离子水稀释至100ml。2.根据权利要求1所述的一种测定植株中硼含量的方法，其特征在于：称取烘干磨碎的植株样品1.01.5g于150ml三角瓶中，加入HNO：HClO=15ml：3ml，插上小漏斗，调节可控温~34电炉保持溶液微沸并摇动三角瓶防止溶液溢出，消煮至溶液澄清（若消煮液不够可继续添加以上比例HNO、HClO），约25ml为止。34~3.根据权利要求1所述的一种测定植株中硼含量的方法，其特征在于：将消煮液转移至100ml容量瓶并定容，吸10ml于25ml容量瓶中，加入两滴甲基红指示剂，用氨水调节溶液至浅橙色（pH为7左右），定容，同时做空白试验。4.根据权利要求1所述的一种测定植株中硼含量的方法，其特征在于：吸取5ml溶液于试管中，依次加入2ml缓冲液，2mlEDTA溶液和2ml甲亚胺溶液，注意每加一种试剂后要充分摇匀，此混合溶液静置1h后，于430nm波长处测定吸光度。5.根据权利要求1所述的一种测定植株中硼含量的方法，其特征在于：称取H3BO30.5715g于1000ml容量瓶中，加蒸馏水溶解后，稀释至刻度，摇匀，转入塑料瓶中保存，此为100ug/ml标准母液。6.根据权利要求1所述的一种测定植株中硼含量的方法，其特征在于：分别吸取此标准母液0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml于试管中，用蒸馏水补至5ml（此标准系列B含量为0ug、20ug、40ug、60ug、80ug、100ug），依次加入2ml缓冲液，2mlEDTA溶液和2ml甲亚胺溶液。2CN115389491A说明书1/4页一种测定植株中硼含量的方法技术领域[0001]本发明涉及测定植株中硼含量的技术领域，特别的，是一种测定植株中硼含量的方法。背景技术[0002]硼是植物必需的微量元素之一，测定植株中硼的方法有甲亚胺比色法、姜黄素比色法、等离子发射光谱法、原子吸收分光光度法。由于硼的原子化温度较高，原子吸收分光光度法测硼已很少用。姜黄素比色法由于硼与姜黄素的显色是在脱水过程中完成，脱水速度的快慢对显色极其重要，为保证脱水速度不对显色产生影响，样品与标准系列的脱水条件必须保证严格一致，显色条件要求严格，不易操作。目前应用最广泛的是甲亚胺比色法和等离子发射光谱法，等离子发射光谱法对试验仪器有所要求，其使用的电感耦合等离子光谱仪，该仪器价格昂贵，且该方法前处理为干灰化法，过程繁琐，需要用马弗炉高温灰化。现有的甲亚胺比色法前处理与等离子发射光谱法前处理类似，需要马弗炉高温灰化2小时左右，弱掌握不好灰化时间与温度，易造成硼提取不完全或损失，现有技术的缺陷和不足：现有的甲亚胺比色