一种与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115896327A(43)申请公布日2023.04.04(21)申请号202211184195.0(22)申请日2022.09.27(71)申请人广东和利农生物种业股份有限公司地址515835广东省汕头市澄海区莲下镇海后村金成路(72)发明人陈木溪陈坤豪杜冰梓林雯陈长明李沛斯林伟财陈银霞(74)专利代理机构北京新科华领知识产权代理事务所(普通合伙)16115专利代理师吴变变(51)Int.Cl.C12Q1/6895(2018.01)C12Q1/6858(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书1页说明书5页序列表（电子公布）附图3页(54)发明名称一种与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记及其应用(57)摘要本发明属于植物选育技术领域，具体涉及一种与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记及其应用。该InDel标记包括序列如SEQIDNO：1和SEQIDNO：2所示的引物对。该InDel标记基于PCR扩增，扩增条带清晰，多态性高、分辨率高，可以准确鉴定芥蓝是否含有菇叶；而且简便易行，可操作性强，经济实用。CN115896327ACN115896327A权利要求书1/1页1.一种与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记，包括序列如SEQIDNO：1和SEQIDNO：2所示的引物对。2.权利要求1所述的与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记在芥蓝育种中的应用。3.权利要求1所述的与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记在芥蓝杂交种纯度鉴定上的应用。4.权利要求1所述的与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记在芥蓝遗传连锁图谱构建中的应用。5.一种鉴定芥蓝菇叶性状的方法，其特征在于，包括：待鉴定芥蓝的DNA作为DNA模板，以权利要求1所述的与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记进行PCR扩增。6.根据权利要求5所述的鉴定芥蓝菇叶性状的方法，其特征在于，包括：提取待鉴定芥蓝的DNA作为DNA模板，以权利要求1所述的与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记进行PCR扩增得扩增产物，扩增产物进行凝胶电泳，带型与有菇叶亲本一致时，植株表现为有菇叶；带型与无菇叶亲本一致时，植株表现为无菇叶；带型为杂合时，则受另一个独立遗传的基因的控制，且当该基因为杂合时，植株表现为有菇叶。2CN115896327A说明书1/5页一种与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记及其应用技术领域[0001]本发明属于植物选育技术领域，具体涉及一种与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记及其应用。背景技术[0002]芥蓝(Brassicaoleraceavar.chinenisLei)是十字花科芸薹属蔬菜，具有较高的营养价值和较好的市场前景。芥蓝遗传多样性较低，但形态性状多样且遗传差异显著，菇叶是着生于芥蓝叶脉上的一种畸形叶，目前对芥蓝菇叶性状的研究甚少。菇叶，又称菇花，是着生于芥蓝叶脉上类似蘑菇的的变态小叶，是一种特殊的植物学性状。目前发现只有小香菇、香菇苔、矮脚香菇、香菇大头甜芥蓝、老种香菇等少数农家品种的芥蓝叶片上着生菇叶，这些菇叶品种芥蓝均属于薹用芥蓝。[0003]随着分子标记技术的日益成熟和完善，InDel标记在种质资源分析、分子标记辅助育种、群体分析、基因定位及遗传图谱构建等方面发挥重要作用，但在有关芥蓝菇叶等特色形状的分子标记开发利用方面的研究相对薄弱。发明内容[0004]针对以上问题，本发明目的在于提供一种与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记，该InDel标记基于PCR扩增，扩增条带清晰，多态性高、分辨率高，可以准确鉴定芥蓝是否含有菇叶；而且简便易行，可操作性强，经济实用。[0005]为了达到上述目的，可以采用以下技术方案：[0006]本发明一方面提供一种与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记，其包括序列如SEQIDNO：1和SEQIDNO：2所示的引物对。[0007]本发明另一方面提供一种上述的与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记在芥蓝育种中的应用。[0008]本发明再一方面提供一种上述的与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记在芥蓝杂交种纯度鉴定上的应用。[0009]本发明再一方面提供一种上述的与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记在芥蓝遗传连锁图谱构建中的应用。[0010]本发明再一方面提供一种鉴定芥蓝菇叶性状的方法，包括：待鉴定芥蓝的DNA作为DNA模板，以上述的与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记进行PCR扩增。[0011]进一步地，上述鉴定芥蓝菇叶性状的方法中，可以包括：提取待鉴定芥蓝的DNA作为DNA模板，以上述的与芥蓝菇叶发生紧密连锁的InDel标记进行PCR扩增得扩增产物，扩增产物进行凝胶电泳，带型与有菇叶亲本一致时，植株表现为有菇叶；带型与无菇叶亲本一致时，