一种多花兰的组培快繁方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107711506A(43)申请公布日2018.02.23(21)申请号201711112094.1(22)申请日2017.11.13(71)申请人秦素梅地址541000广西壮族自治区桂林市叠彩区芦笛路南二巷6号1-4(72)发明人秦素梅(74)专利代理机构南宁新途专利代理事务所(普通合伙)45119代理人但玉梅(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)A01N65/42(2009.01)A01N37/02(2006.01)A01P1/00(2006.01)权利要求书1页说明书6页(54)发明名称一种多花兰的组培快繁方法(57)摘要本发明提供一种多花兰的组培快繁方法，属于植物组织培养技术领域。该方法包括外植体的消毒、诱导培养、继代培养及壮苗培养等步骤。其中，外植体的消毒采用酒精消毒和植物消毒液配合消毒的方式，植物消毒液的有效成分是乙酰紫草素、芦荟汁、夹竹桃叶提取物；各个培养阶段中所使用的培养基中添加了辣木叶汁和枸杞叶汁作为营养剂。本发明的方法对外植体的伤害小，且采用本发明提供的培养基配方可显著提高多花兰的诱导分化率、外植体增殖系数及生根率，缩短培养周期，提高多花兰组培苗的质量。CN107711506ACN107711506A权利要求书1/1页1.一种多花兰的组培快繁方法，包括外植体的消毒、诱导培养、继代培养及壮苗培养，其特征在于具体步骤为：(1)外植体的消毒：采集多花兰的茎尖作为外植体，外植体长2cm-4cm，首先用流水冲洗，再用体积浓度为75％的酒精浸泡1min后剥去表面部分叶片，接着在植物消毒液中浸泡8min-15min后继续剥去部分叶片，随后在所述植物消毒液中继续浸泡5-10min，用无菌水冲洗2-4次，最后移入超净工作台内，在解剖镜下剥去剩下的叶片，露出生长点，用解剖刀切取2-5mm大小的茎尖分生组织；所述植物消毒液由以下重量份的原料混合制成：乙酰紫草素0.05-0.08份，芦荟汁5-8份，夹竹桃叶提取物0.1-0.2份，吐温-602-4份，水95-100份；(2)诱导培养：将所述茎尖分生组织接种在诱导培养基内，在温度为25±1℃，光照为2000LX，每天光照10-14h的条件下培养48-52天，得多花兰园球茎；所述诱导培养基的组成为：花宝1号3g/L+活性炭1g/L+赤霉素1mg/L-2mg/L+琼脂5.0g/L-8.0g/L+蔗糖2.0g/L-4.0g/L+辣木叶汁5.0g/L-8.0g/L+枸杞叶汁3.0g/L-5.0g/L；(3)继代培养：将步骤(2)中生长得到的多花兰园球茎转接入继代培养基内，在温度为25±1℃，光照为2000LX，每天光照10-14h的条件下培养，随着园球茎的生长不断更换培养基，继代培养75-85天后，得到长根长叶的多花兰幼株；(4)壮苗培养：将多花兰幼株转接到壮苗培养基中，培养至根数为3-5条，叶片3-4片，苗高4-8cm，即得到可以移栽的多花兰幼苗。2.根据权利要求1所述的多花兰的组培快繁方法，其特征在于：所述继代培养基的组成为：花宝1号3g/L+活性炭1g/L+萘乙酸2mg/L-3mg/L+琼脂5.0g/L-8.0g/L+辣木叶汁5.0g/L-8.0g/L+枸杞叶汁3.0g/L-5.0g/L+蔗糖2.0g/L-4.0g/L。3.根据权利要求1所述的多花兰的组培快繁方法，其特征在于：所述壮苗培养基的组成为：1/2MS+活性炭1g/L+吲哚丁酸0.4mg/L-0.6mg/L+琼脂5.0g/L-8.0g/L+辣木叶汁5.0g/L-8.0g/L+枸杞叶汁3.0g/L-5.0g/L+蔗糖2.0g/L-4.0g/L。4.根据权利要求1所述的多花兰的组培快繁方法，其特征在于：所述夹竹桃提取物的提取方法为：将新鲜夹竹桃叶捣碎成浆，用体积浓度为70％-75％的乙醇回流提取2-6次，乙醇与所述夹竹桃叶的液料比为5-8：1；合并滤液，浓缩、干燥得夹竹桃叶醇提物；以丙酮∶正丁醇体积比为3-4：1的混合液为提取剂，向所述夹竹桃叶醇提物中加入提取剂，提取2-5次，合并提取液，回收所述提取剂得到夹竹桃叶抑菌成分提取物。5.根据权利要求1所述的多花兰的组培快繁方法，其特征在于：所述辣木叶汁和枸杞叶汁的制备方法是：先洗净叶片然后充分捣碎，再用纱布过滤，所述滤液即为相应的汁。6.根据权利要求1所述的多花兰的组培快繁方法，其特征在于：所述芦荟汁是将芦荟除去表皮后，用机器搅打成汁得到的。2CN107711506A说明书1/6页一种多花兰的组培快繁方法【技术领域】[0001]本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种多花兰的组培快繁方法。【背景技术】[0002]多花兰(Cymbidiumfloribundum)为兰科兰属附生类植物，属