温敏桃叶珊瑚苷印迹修饰复合材料的制备方法及应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112266452A(43)申请公布日2021.01.26(21)申请号202011235572.XB01D15/08(2006.01)(22)申请日2020.11.09(71)申请人吉首大学地址416000湖南省湘西土家族苗族自治州吉首市人民南路120号(72)发明人李辉毛琳罗晓玥许国强李克纲(51)Int.Cl.C08F292/00(2006.01)C08F220/54(2006.01)C08F220/56(2006.01)C08F222/14(2006.01)C08F212/36(2006.01)C08J9/26(2006.01)B01J20/26(2006.01)B01J20/30(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称温敏桃叶珊瑚苷印迹修饰复合材料的制备方法及应用(57)摘要本发明公开了一种温敏性桃叶珊瑚苷印迹修饰氧化石墨烯复合材料的制备方法及应用于杜仲籽粨醇提液中桃叶珊瑚苷的固相萃取分离方法，包括（1）乙烯基修饰氧化石墨烯的合成；（2）温敏性桃叶珊瑚苷印迹修饰氧化石墨烯的制备；（3）温敏性桃叶珊瑚苷印迹修饰氧化石墨烯复合材料的分离应用。本发明制备的印迹复合材料对杜仲籽粨醇提液中的桃叶珊瑚苷具有温敏性的吸附和脱附能力及选择和富集能力，可用于植物中桃叶珊瑚苷的分离和纯化，且该种印迹复合材料可重复使用，具有较好的应用前景。CN112266452ACN112266452A权利要求书1/1页1.一种印迹修饰复合材料分离纯化桃叶珊瑚苷的方法，其特征在于包含以下几个步骤：（1）乙烯基修饰氧化石墨烯的合成：将200mg石墨烯纳米片加入到10-15mL水-乙醇混合溶液（1:1,V/V）中，超声搅拌60min后，加入氨水调节溶液至弱碱性，在20min时间内缓慢滴入6-12mL3-甲基丙烯酰氧基-丙基-三甲氧基硅烷，搅拌均匀后，于60℃温度下反应24h，冷却，离心分离固体，依次用20mL乙醇和去离子水洗涤3次，所得固体置于50℃真空干燥箱12h得乙烯基修饰氧化石墨烯；（2）温敏性桃叶珊瑚苷印迹修饰氧化石墨烯的制备：称取2.0-5.0mmol桃叶珊瑚苷，溶于20-30mL含0.2%乙酸的乙腈/甲醇(3:1，V/V)混合溶液中,加入8.0-15.0mmol丙烯酰胺和10.0-30.0mmolN-异丙基丙烯酰胺,搅拌，静置30min；加入10.0-15.0mmol乙二醇二甲基丙烯酸酯和20.0-40.0mmol二乙烯基苯，混合均匀，再加入50mg二苯甲酮，搅拌，通氩气15min；加入120-150mg乙烯基修饰氧化石墨烯，超声波处理10min，真空密封，将反应体系置于紫外灯下室温照射36h，吸出上层清液后，用0.45um的微孔滤膜过滤，收集的固体依次用30mL甲醇-乙酸（9:1,V/V）、30mL甲醇及30mL四氢呋喃浸提2次，每次2h，过滤，真空干燥，得温敏性桃叶珊瑚苷印迹修饰氧化石墨烯复合材料；（3）桃叶珊瑚苷的分离纯化：将1.2-3.0g温敏性桃叶珊瑚苷印迹修饰氧化石墨烯复合材料装入固相萃取管中，于25℃下依次用15mL甲醇-水（1:1,V/V）混合溶液和10mL乙腈洗涤萃取柱中的残余化合物并平衡后，进行固相萃取；控制固相萃取柱温度为40-45℃，将12-18mL含有桃叶珊瑚苷的杜仲籽粨乙醇提取物浓缩液流过复合材料吸附剂层，收集流出液并分析泄露的目标物浓度后计算萃取柱上样量，降低萃取柱温度为25-35℃，依次用10-15mL乙腈、10-15mL乙腈-丙酮（1:1,V/V）混合溶液和10-15mL乙酸乙酯-乙醇（95:5,V/V）混合溶液洗涤吸附在萃取柱中的杂质化合物，再用30-50mL40-50%的乙醇水溶液进行洗脱，收集乙醇洗脱液，减压蒸馏大部分溶剂后，溶解于3-8mL去离子水中，并置于2-5℃低温下重结晶，得纯度为75-85%的桃叶珊瑚苷晶体。2CN112266452A说明书1/4页温敏桃叶珊瑚苷印迹修饰复合材料的制备方法及应用技术领域[0001]本发明属于新材料领域，具体涉及一种对桃叶珊瑚苷具有温敏性高选择吸附和脱附能力的新型印迹修饰氧化石墨烯复合材料的制备方法及固相萃取分离和纯化。背景技术[0002]杜仲是我国的一种名贵中药材，因其具有补肝肾、壮筋骨、降血压、抗衰老、抗炎等功效而在《神农本草经》中被誉为上品。桃叶珊瑚甙(aucubin)是其中重要的生物活性成分之一，杜仲籽经超临界萃取亚麻酸后的杜仲粕中含有约8%的桃叶珊瑚苷。最近的研究表明，桃叶珊瑚苷具有抗菌消炎、降压、保肝护肝、清湿热、利小便、镇痛、抗肿瘤等生物活性，并且在预防禽流感方面也有一定效果。目前，桃叶珊瑚甙的提取分离方法主要有冷浸提取法、回流提取法、超声波提取法、超临界CO