用于治疗ATP酶介导的疾病的组合物和方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114072514A(43)申请公布日2022.02.18(21)申请号202080047216.7(74)专利代理机构北京市金杜律师事务所(22)申请日2020.05.1411256代理人陈文平(30)优先权数据62/847,4162019.05.14US(51)Int.Cl.C12N15/86(2006.01)(85)PCT国际申请进入国家阶段日2021.12.27(86)PCT国际申请的申请数据PCT/US2020/0329782020.05.14(87)PCT国际申请的公布数据WO2020/232297EN2020.11.19(71)申请人杜克大学地址美国北卡罗来纳州(72)发明人M·米卡蒂A·胡南扬B·坎托尔A·阿索坎权利要求书3页说明书44页R·普拉纳姆D·科贝尔勒序列表51页附图23页(54)发明名称用于治疗ATP酶介导的疾病的组合物和方法(57)摘要本公开内容提供用于治疗受试者中的ATP酶介导的疾病的核酸表达盒、载体、组合物和方法。CN114072514ACN114072514A权利要求书1/3页1.核酸表达盒，其包含编码ATP酶的核酸序列。2.权利要求1的核酸表达盒，其中所述ATP酶选自ATP1A1、ATP1A2、ATP1A3、ATP2C1、ATP6A1、ATP6V1B1、ATP6V0A4、ATP7A、ATP7B或ATP11C。3.权利要求1的核酸表达盒，其中所述核酸序列包含SEQIDNO：01所示的序列或者其片段、同种型或同源物。4.权利要求2的核酸表达盒，其中所述核酸序列包含与SEQIDNO：01所示的序列具有至少80％同一性的序列。5.权利要求1的核酸表达盒，其中所述核酸序列包含SEQIDNO：02的序列或者其片段、同种型或同源物。6.权利要求4的核酸表达盒，其中所述核酸序列包含与SEQIDNO：02所示的序列具有至少80％同一性的序列。7.权利要求1的核酸表达盒，其中所述核酸序列包含SEQIDNO：07所示的序列或者其片段、同种型或同源物。8.权利要求4的核酸表达盒，其中所述核酸序列包含与SEQIDNO：07所示的序列具有至少80％同一性的序列。9.权利要求1‑7中任一项的核酸表达盒，其中所述表达盒进一步包含编码ATP1A3的核苷酸序列，其经密码子优化以减少CpG甲基化位点并用于哺乳动物表达。10.根据权利要求1‑8任一项的核酸表达盒，其中编码ATP1A3的核酸序列可操作地连接启动子和聚腺苷酸化序列。11.权利要求9的核酸表达盒，其中所述启动子包含神经元特异性启动子。12.权利要求10的核酸表达盒，其中所述神经元特异性启动子选自突触蛋白1、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II、微管蛋白α1、神经元特异性烯醇化酶和血小板衍生生长因子β链启动子。13.根据权利要求11的核酸表达盒，其中所述启动子是人突触蛋白启动子。14.权利要求12的核酸表达盒，其中所述人突触蛋白启动子包含突触蛋白1启动子的近侧区(‑422至‑22)。15.权利要求13的核酸表达盒，其中所述人突触蛋白启动子包含SEQIDNO：05所示的核酸序列。16.权利要求12的核酸表达盒，其中所述人突触蛋白启动子包含SEQIDNO：04或SEQIDNO：09所示的核酸序列。17.权利要求9的核酸表达盒，其中所述启动子选自组成型活性启动子。18.权利要求16的核酸表达盒，其中所述组成型活性启动子选自人β‑肌动蛋白、人延伸因子‑1α、与巨细胞病毒早期增强子组合的鸡β‑肌动蛋白、巨细胞病毒(CMV)、猿猴病毒40和单纯疱疹病毒胸苷激酶。19.权利要求1‑17中任一项的核酸表达盒，其中所述核酸表达盒进一步包含选自下述的转录终止信号：牛生长激素聚腺苷酸化信号(BGHpA)、猿猴病毒40聚腺苷酸化信号(SV40pA)和合成聚腺苷酸化信号。20.载体，其包含编码ATP酶的核酸序列。21.权利要求19的载体，其中所述载体是病毒载体或非病毒载体。2CN114072514A权利要求书2/3页22.权利要求20的载体，其中所述载体是重组病毒载体。23.权利要求20的载体，其中所述病毒载体选自腺病毒载体、腺相关病毒载体、单纯疱疹病毒载体、逆转录病毒载体、慢病毒载体和甲病毒载体、黄病毒载体、弹状病毒载体、麻疹病毒载体、新城疫病毒载体、痘病毒载体或小核糖核酸病毒载体。24.权利要求21的载体，其中所述腺病毒载体是选自下述的AAV血清型：AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAVrh74、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV12和AAV13。25.权利要求23的载体，其中所述腺病毒载体是选自AAV1、AAV8或AAV9的AAV血清型。26.权利要求23的载体，其