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(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114436802A(43)申请公布日2022.05.06(21)申请号202210049311.1C07C45/79(2006.01)(22)申请日2022.01.17C07D307/92(2006.01)C07D311/16(2006.01)(71)申请人中国医学科学院药用植物研究所海A61P35/00(2006.01)南分所A61P25/20(2006.01)地址571500海南省万宁市兴隆药植所院A61P25/00(2006.01)内A01N43/08(2006.01)(72)发明人陈德力马国需杨云王灿红A01N43/16(2006.01)魏建和许旭东A01N35/06(2006.01)(74)专利代理机构广州三环专利商标代理有限A01P3/00(2006.01)公司44202A23B7/154(2006.01)专利代理师赵晓娟(51)Int.Cl.C07C49/757(2006.01)C07C49/733(2006.01)C07C49/747(2006.01)权利要求书2页说明书12页附图5页(54)发明名称一种杜松烷倍半萜化合物及其制备方法和应用(57)摘要本申请公开了一种杜松烷倍半萜化合物的制备方法,通过黄槿提取液制备得到八种杜松烷倍半萜化合物。公开了所述杜松烷倍半萜化合物在制备防治肝癌药物、乳腺癌药物、神经保护剂或镇静安神、促睡眠药物中的应用。公开了所述杜松烷倍半萜化合物在防治植物匍枝根霉病、棉花黄萎病、水稻纹枯病、棉花枯萎病和尖孢镰刀菌病中的应用。CN114436802ACN114436802A权利要求书1/2页1.一种杜松烷倍半萜化合物的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)将干燥粉碎后的黄槿茎用二氯甲烷提取,得到黄槿提取液;(2)所述黄槿提取液经硅胶柱层析、混合洗脱剂洗脱,用薄层色谱分析,展开剂为石油醚、CH2Cl2、MeOH的体积比2:4‑9:5.5,得到Frs.C、Frs.D和Frs.E;所述混合洗脱剂为石油醚与CH2Cl2以100:0‑0:100比例混合,或石油醚与MeOH以50:1‑1:1比例混合;(3)Frs.C经硅胶柱层析,用石油醚与CH2Cl2以6:1‑0:100的体积比洗脱或CH2Cl2与MeOH以40:1‑1:1的体积比洗脱,得到Fr.C3馏分和Fr.C5馏分;Fr.C5采用半制备液相色谱分离,甲醇‑水以3.9‑4.2:1体积比洗脱,得到1H和3H组分;在SB‑phenyl柱上用65%甲醇‑水以体积比1.8‑2.2:1纯化1H组分,得到化合物1;在SB‑phenyl柱上用65%的甲醇‑水以体积比1.8‑2.2:1梯度纯化3H组分,得到化合物3;Fr.C3采用高效液相色谱,85%甲醇‑水以2.6‑3.3:1体积比梯度洗脱,在YMCC18色谱柱上纯化,得到化合物5;(4)Fr.D经硅胶柱层析,用石油醚与CH2Cl2以6:1‑0:100的体积比洗脱或CH2Cl2与MeOH以40:1‑1:1的体积比洗脱,得到Fr.D1和Fr.D3;Fr.D1用半制备高效液相色谱法分离,甲醇‑水以6.5‑7.2:3体积比洗脱,得到化合物1和2;Fr.D3采用高效液相色谱法,65%甲醇‑水以体积比2.6‑3.3:2纯化,得到化合物6;(5)Fr.E经硅胶柱层析,用石油醚与CH2Cl2以1:1‑0:100的体积比洗脱或CH2Cl2与MeOH以40:1‑1:1的体积比洗脱,得到Fr.E1;Fr.E1经硅胶柱层析用石油醚与CH2Cl2以4:1‑0:100的体积比洗脱或CH2Cl2与MeOH以99:1‑1:1的体积比洗脱,得到Fr.E1‑2和Fr.E1‑5;在SB‑phenyl柱上,以75%甲醇‑水以体积比1.8‑2.3:1为溶剂,采用高效液相色谱法对Fr.E1‑2进行纯化,得到化合物4和化合物7;在SB‑phenyl柱上,以70%甲醇‑水体积比2.6‑3.5:1为溶剂,采用高效液相色谱法对Fr.E1‑5进行分离,得到化合物8。2.根据权利要求1所述的一种杜松烷倍半萜化合物的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中收集第一Rf值在0.15‑0.25之间的馏分为Frs.C,第二Rf值在0.25‑0.40之间的馏分为Frs.D,第三Rf值在0.40‑0.50之间的馏分为Frs.E。3.根据权利要求1所述的一种杜松烷倍半萜化合物的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中Fr.C洗脱的流速为15ml/min,Fr.C3的保留时间RT为12.5min,Fr.C5的保留时间RT为17.8min;所述步骤(4)中Fr.D洗脱的流速为15ml/min,Fr.D1的保留时间RT为10.6min;Fr.D3的保留时间RT为16.3min;所述步骤(5)中Fr.E洗脱的流速为15m