轮状病毒亚单位疫苗及其制备和使用的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN104203274104203274A(43)申请公布日2014.12.10(21)申请号201380015512.9(51)Int.Cl.(22)申请日2013.02.14A61K39/15(2006.01)(30)优先权数据61/598,6242012.02.14US(85)PCT国际申请进入国家阶段日2014.09.22(86)PCT国际申请的申请数据PCT/US2013/0261792013.02.14(87)PCT国际申请的公布数据WO2013/123219EN2013.08.22(71)申请人梅里亚有限公司地址美国佐治亚(72)发明人R·F·柏R·R·西蒙逊K·R·斯里吉雷迪B·M·豪瑟(74)专利代理机构中国国际贸易促进委员会专利商标事务所11038代理人刘晓东权利要求书1页权利要求书1页说明书25页说明书25页序列表63页序列表63页附图20页附图20页(54)发明名称轮状病毒亚单位疫苗及其制备和使用的方法(57)摘要本发明提供了在动物或人中引发抗轮状病毒的免疫反应的轮状病毒抗原性多肽或抗原、包含所述轮状病毒多肽的组合物、接种以抗轮状病毒的方法，以及用于这样的方法和组合物的试剂盒。本发明还提供了用于产生疫苗抗原性多肽的新型表达载体。CN104203274ACN104237ACN104203274A权利要求书1/1页1.一种免疫组合物，其包含：a)选自轮状病毒多肽或其片段的一种或多种多肽；和b)药学上或兽医学上可接受的媒介物、稀释剂或赋形剂。2.权利要求1的组合物，其还包含佐剂。3.权利要求2的组合物，其中所述佐剂是水包油型的。4.权利要求2或3的组合物，其中所述佐剂为TRIGEN或ULTRAGEN或PRIMAVANT、TS6或LR4。5.权利要求1至3中任一项的组合物，其中所述多肽与SEQIDNO:17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69或71中所示的序列具有至少80％的序列同一性。6.权利要求1-3或5中任一项的组合物，其还包含与除轮状病毒外的病原体相关的至少一种另外的抗原。7.权利要求6的组合物，其中所述至少一种另外的抗原能够在猪中引发抗肺炎支原体、PCV2、PRRSV、SIV或其它病原体的免疫反应，所述其它病原体能够感染猪并引起疾病或对疾病的易感性。8.一种用于产生权利要求1-3、5或7中任一项的自体组合物的方法，包括步骤：(a)从已知感染有或怀疑感染有一种或多种类型的轮状病毒的动物获得生物样品；(b)如果感染状态未知，则确定所述动物是否被轮状病毒感染；(c)从被所述一种或多种类型的轮状病毒感染的动物收获RNA；(d)使用与至少一个组C轮状病毒基因互补的引物进行逆转录酶PCR；(e)将来自步骤(d)的PCR产物插入适当的表达载体；(f)将步骤(e)中产生的载体置于适当的宿主表达系统中；(g)收获轮状病毒多肽；和(h)添加任何另外的疫苗组分，从而产生疫苗组合物。9.权利要求8的方法，其中所述另外的组分选自佐剂、载体、稀释剂和与除轮状病毒外的病原体相关的抗原。10.权利要求9的方法，其中所述另外的组分为TRIGEN或ULTRAGEN。11.权利要求9的方法，其中所述另外的组分为能够在猪中引发抗肺炎支原体、PCV2、PRRSV、SIV或其它病原体的免疫反应的抗原，所述其它病原体能够感染猪并引起疾病或对疾病的易感性。12.一种接种动物的方法，包括权利要求1至7中任一项的组合物或载体的至少一次施用。13.权利要求12的方法，其中所述动物是猪。14.权利要求13的方法，其中所述猪是分娩前约3周至约6周的母猪。15.权利要求12的方法，其中所得的猪崽相较于来自未接种的母猪的猪崽具有降低的发病率和/或死亡率。2CN104203274A说明书1/25页轮状病毒亚单位疫苗及其制备和使用的方法发明领域[0001]本申请要求2012年2月14日提交的美国临时专利申请系列No.USSN61/598,624的优先权，将所述美国临时专利申请通过引用整体并入本文。[0002]发明领域[0003]本发明总地来说涉及亚单位疫苗，具体地包含已被工程化以在遗传和抗原性上与由感染目标动物群体的病毒表达的肽几乎相同的轮状病毒肽的那些疫苗。通过毒素/解毒剂选择系统在细菌细胞群体中维持表达抗原性肽或亚单位蛋白的质粒。细菌细胞产生毒性蛋白，该毒性蛋白被由质粒编码的具有肽的解毒蛋白中和，从而使得非转化细胞不能存活。[0004]背景[0005]轮状病毒是婴儿和幼儿中严重腹泻的最常见原因(DennehyPH,2000)，并且是引起通常称为肠胃感