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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106234214A(43)申请公布日2016.12.21(21)申请号201610601582.8(22)申请日2016.07.26(71)申请人象山宏森源农产品开发有限公司地址315700浙江省宁波市象山县墙头镇(72)发明人周开全陈子敏李谦盛李方盛(74)专利代理机构北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙)11548代理人李静(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书2页说明书5页(54)发明名称一种乌紫杨梅苗组培繁殖技术(57)摘要本发明公开了一种乌紫杨梅苗组培繁殖技术,所述乌紫杨梅苗组培繁殖技术,包括以下步骤:1)前处理,2)无菌组织建立,3)愈伤组织分化培养及扩大培养,4)增长培养,5)分化出根,6)移栽培养;本发明所提供的组培繁殖技术,具有繁殖系数高、生产周期短、程序简单易于操作、成本低廉等优点,适于乌紫杨梅苗的快速繁殖。CN106234214ACN106234214A权利要求书1/2页1.一种乌紫杨梅苗组培繁殖技术,其特征在于,包括以下步骤:1)前处理挑选健康无虫害15cm长左右的乌紫杨梅苗,去除杂叶和顶芽,使用无菌水清洗枝条表面的灰尘并裁剪成四个茎段;随后置于2%浓度的二氧化氯溶液中浸泡10min,使用小苏打水冲洗15-20min,并置于保鲜膜中喷水放置,放置时间不超过6h;2)无菌组织建立在无菌工作台上,将步骤1)中采集到的茎段放入锥形瓶中,首先加入过氧化氢在摇床上进行摇晃浸泡2min,迅速倒出,然后加入次氯酸钠溶液进行搅拌处理5min,处理后使用无菌水反复冲洗,并使用热风机吹干茎段表面的水分;使用无菌刀沿着茎段的横向位置将茎段剪开小断口,随后将含有小断口的茎段接种在初代培养基中,并使其保持直立,初代培养条件为:黑暗,24℃-26℃,培养8天-10天;3)愈伤组织分化培养及扩大培养将在初代培养基中培养后的材料放置愈伤组织培养基中进行诱导分化,直至茎段中的小断口产生淡黄色愈伤组织,愈伤组织培养条件为:1000Lx-1500Lx,28℃-30℃,光照时间12h-16h,黑暗时间12h-8h,培养8天-10天;愈伤组织培养结束后,将茎段放置扩大培养基中进行增殖培养,如此循环往复,直至得到所需数量的无根苗;4)增长培养将无根苗的基部切开产生小断口,转入到增长培养基中培养,直至小断口处生芽长度为2cm以上时,并切下放置增长培养基中继续培养7天,增长培养条件为900Lx,28℃-30℃,光照时间4h-8h,黑暗时间20h-16h;5)分化出根增长后的无根苗达到12cm-14cm时,将它们转入生根诱导培养基中,生根诱导培养条件为:开始的3天-5天,黑暗,24℃培养;1400Lx光照,28℃培养15天;6)移栽培养待苗生根3-5条,根长5-8cm时,使用无菌水彻底洗净苗根,并在0.8%浓度的高锰酸钾溶液中浸泡3min,最后移栽到由细砂土、硅藻土和腐殖质组成并灭菌的基质中,套上塑料膜,保持相对湿度67%-70%,温度30℃-32℃,3600Lx光照,20h,随后按照一般试管苗方法进行管理。2.根据权利要求1所述的乌紫杨梅苗组培繁殖技术,其特征在于,所述初代培养基主要成份为MS+0.8mg/LBA+2mg/L青蒿素+2mg/LZR+45mg/L肌醇+38g/L蔗糖+4g/L琼脂,pH5.8-6.0。3.根据权利要求1或2所述的乌紫杨梅苗组培繁殖技术,其特征在于,所述愈伤组织培养基主要成份为1/2MS+1/2WPM+4mg/L6-BA+12mg/L大蒜素+340mg/L香蕉粉+30g/L蔗糖+6g/L琼脂,pH5.8-6.0。4.根据权利要求3所述的乌紫杨梅苗组培繁殖技术,其特征在于,所述扩大培养基培养基主要成份为MS+0.4mg/LNAA+0.7mg/LIBA+40mg/L人参提取物+60mg/L赖氨酸+35g/L蔗糖+4g/L琼脂,pH5.8-6.0。5.根据权利要求4所述的乌紫杨梅苗组培繁殖技术,其特征在于,所述增长培养基主要成份为MS+0.6mg/LNAA+0.1mg/LKT+200mg/L香豆酸+4g/L半乳糖+31g/L蔗糖+5g/L琼脂,2CN106234214A权利要求书2/2页pH5.9-6.4。6.根据权利要求4所述的乌紫杨梅苗组培繁殖技术,其特征在于,所述生根诱导培养基主要成份为MS+0.8mg/LNAA+0.8mg/LIBA+4.8mg/LD-酒石酸+6.1mg/LL-高丝氨酸内酯盐酸盐+32g/L蔗糖+4.6g/L琼脂,pH6.0-6.5。3CN106234214A说明书1/5页一种乌紫杨梅苗组培繁殖技术技术领域[0001]本发明涉及植物组织培养技术领域,具体是一种乌紫杨梅苗组培繁殖技术。背景技术[000